Mine otse sisu juurde
EB3
Kude
Bone
Haigus
Burkitt'i lümfoom
Metastaaside asukoht
Bone
Sünonüümid
EB-3, Epstein-Barr-3, GM04679

Dokumendid

EB3

Cell line · Toote number 300373

The EB3 cell line is a human Burkitt lymphoma model that was originally derived from a young child with a maxillary tumor in Uganda. It is one of several ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

EB3 rakuliin on inimese Burkitt'i lümfoomi mudel, mis on algselt saadud Ugandas noorelt lapselt, kellel oli lõualuu kasvaja. See on üks mitmest väljakujunenud Burkitt'i lümfoomi rakuliinist, mis loodi selle pahaloomulise haiguse immunoloogiliste ja bioloogiliste omaduste varajase uurimise käigus. EB3 rakud väljendavad tugevat membraani immunofluorestsentsi reaktiivsust, kui neid uuritakse seerumiga, mis pärineb Burkitt'i lümfoomi patsientidelt, kes on pärast keemiaravi remissioonis, mis näitab, et nende pinnal on olemas kasvajaga seotud antigeenid. Seda reaktiivsust vahendavad tõenäoliselt IgG-klassi antikehad, nagu on näidatud fluorestseiiniga konjugeeritud anti-IgG-reaktiivide abil. EB3 reageeris tugevalt koos teiste Burkitt'i liinidega, nagu Jijoye, B35M ja SL1, samas kui teatud teised Burkitt'i liinid, nagu Raji, ei näidanud samades tingimustes sarnast reaktsioonivõimet.

EB3 rakud olid üks neist, mida kasutati varajastes võrdlevates uuringutes, et eristada Burkitt'i lümfoomi kasvajaspetsiifilisi ja isoantigeenseid reaktsioone. Need uuringud näitasid, et mõnede patsientide seerumid - eriti täielikus remissioonis olevate patsientide seerumid - võivad selektiivselt ära tunda Burkitt'i lümfoomi rakke võrreldes normaalse luuüdi või sama doonori lümfotsüütidega, mis viitab kasvaja-spetsiifilistele immunogeensetele markeritele. Lisaks sellele ilmnesid EB3 rakkudel morfoloogilised ja immunofenotüüpilised tunnused, mis on kooskõlas suurte lümfoblastilaadsete Burkitt'i lümfoomirakkudega, mis kipuvad reageeriva seerumi mõjul ilmutama heledat granulaarset membraanivärvi. See ajalooline EB3 immunoloogiline profileerimine aitas luua aluse hilisematele uuringutele, milles uuriti kasvajaspetsiifilisi antigeene lümfoidsete pahaloomuliste kasvajate puhul.

Kude
Bone
Haigus
Burkitt'i lümfoom
Metastaaside asukoht
Bone
Rakendused
3D rakukultuur, immunoloogia
Sünonüümid
  • EB-3
  • Epstein-Barr-3
  • GM04679

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Lümfoblastid
Rakutüüp
B-lümfotsüüt

04Tunnused

Viide
EB3 (Cytioni katalooginumber 300373)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1185

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Pinnaantigeenid
HLA A3, Aw32, Cw2
Isoensüümid
G6PD, A
Viirused
EBV (EBNA pos)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Kultuuri edasikasvatamine
Homogeniseerige kolvis olev rakususpensioon õrnalt pipeteerides üles-alla, seejärel võtke representatiivne proov, et määrata rakkude tihedus ml kohta. Lahjendage suspensiooni värske kultuurikeskkonnaga, et saavutada rakkude kontsentratsioon 1 x 105 rakku/ml, ja jaotage reguleeritud suspensioon uute kolvide vahel edasiseks kasvatamiseks.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
3 aastat
Etniline kuuluvus
Aafrika