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EB3
Tessuto
Osso
Malattia
Linfoma di Burkitt
Sito metastatico
Osso
Sinonimi
EB-3, Epstein-Barr-3, GM04679

Documenti

EB3

Cell line · Codice prodotto 300373

The EB3 cell line is a human Burkitt lymphoma model that was originally derived from a young child with a maxillary tumor in Uganda. It is one of several ...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare EB3 è un modello di linfoma di Burkitt umano originariamente derivato da un bambino con un tumore mascellare in Uganda. È una delle numerose linee cellulari di linfoma di Burkitt create durante le prime ricerche sulle caratteristiche immunologiche e biologiche di questa neoplasia. In particolare, le cellule EB3 esprimono una forte reattività all'immunofluorescenza di membrana quando vengono testate con il siero di pazienti affetti da linfoma di Burkitt in remissione dopo la chemioterapia, suggerendo la presenza di antigeni associati al tumore sulla loro superficie. Questa reattività è probabilmente mediata da anticorpi di classe IgG, come dimostrato utilizzando reagenti anti-IgG coniugati con fluoresceina. Le EB3 hanno reagito fortemente insieme ad altre linee derivate da Burkitt come Jijoye, B35M e SL1, mentre altre linee Burkitt, come Raji, non hanno mostrato una reattività simile nelle stesse condizioni.

Le cellule EB3 sono state tra quelle utilizzate nei primi studi comparativi per distinguere tra risposte tumore-specifiche e isoantigeniche nel linfoma di Burkitt. Queste indagini hanno dimostrato che i sieri di alcuni pazienti, in particolare quelli in remissione completa, sono in grado di riconoscere selettivamente le cellule del linfoma di Burkitt rispetto al midollo osseo normale o ai linfociti dello stesso donatore, il che indica la presenza di marcatori immunogenici specifici per il tumore. Inoltre, le cellule EB3 hanno mostrato caratteristiche morfologiche e immunofenotipiche coerenti con le grandi cellule del linfoma di Burkitt simili ai linfoblasti, che tendono a mostrare una colorazione granulare brillante della membrana quando sono esposte a siero reattivo. Questo storico profilo immunologico di EB3 ha contribuito a gettare le basi per studi successivi che esplorano gli antigeni specifici del tumore nelle neoplasie linfoidi.

Tessuto
Osso
Malattia
Linfoma di Burkitt
Sito metastatico
Osso
Applicazioni
coltura cellulare 3D, Immunologia
Sinonimi
  • EB-3
  • Epstein-Barr-3
  • GM04679

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Linfoblasto
Tipo di cellula
Linfocita B

04Identificatori

Riferimento bibliografico
EB3 (numero di catalogo Cytion 300373)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1185

05Espressione e suscettibilità

Antigeni di superficie
HLA A3, Aw32, Cw2
Isoenzimi
G6PD, A
Virus
EBV (EBNA pos)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente
Subcoltura
Omogeneizzare delicatamente la sospensione cellulare nel pallone pipettando verso l'alto e verso il basso, quindi prelevare un campione rappresentativo per determinare la densità cellulare per ml. Diluire la sospensione per ottenere una concentrazione cellulare di 1 x 105 cellule/ml con terreno di coltura fresco e aliquotare la sospensione regolata in nuovi palloni per l'ulteriore coltivazione.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
3 anni
Etnia
Africano