Pāriet uz saturu
EB3
Audums
Bone
Slimība
Burkita limfoma
Metastāžu vieta
Bone
Sinonīmi
EB-3, Epstein-Barr-3, GM04679

Dokumenti

EB3

Cell line · Preces numurs 300373

The EB3 cell line is a human Burkitt lymphoma model that was originally derived from a young child with a maxillary tumor in Uganda. It is one of several ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

EB3 šūnu līnija ir cilvēka Burkita limfomas modelis, kas sākotnēji tika iegūts no maza bērna ar augšžokļa audzēju Ugandā. Tā ir viena no vairākām izveidotajām Burkita limfomas šūnu līnijām, kas radītas, veicot agrīnus pētījumus par šī ļaundabīgā audzēja imunoloģiskajām un bioloģiskajām īpašībām. EB3 šūnas izrāda spēcīgu membrānas imunofluorescences reaktivitāti, ja tās pārbauda ar serumu, kas iegūts no Burkita limfomas pacientiem, kuriem pēc ķīmijterapijas ir remisija, kas liecina par audzēja saistītu antigēnu klātbūtni uz to virsmas. Šo reaktivitāti, visticamāk, nodrošina IgG klases antivielas, kā pierādīts, izmantojot ar fluoresceīnu konjugētus anti-IgG reaģentus. Tika konstatēts, ka EB3 spēcīgi reaģē kopā ar citām no Burkita iegūtām līnijām, piemēram, Jijoye, B35M un SL1, savukārt dažas citas Burkita līnijas, piemēram, Raji, tādos pašos apstākļos neuzrādīja līdzīgu reaktivitāti.

EB3 šūnas bija vienas no tām, kas tika izmantotas agrīnajos salīdzinošajos pētījumos, lai nošķirtu audzēja specifisko un izoantigēno reakciju Burkita limfomā. Šie pētījumi parādīja, ka dažu pacientu serumi - jo īpaši pacientu, kuriem ir pilnīga remisija - var selektīvi atpazīt Burkitta limfomas šūnas, nevis normālas kaulu smadzenes vai tā paša donora limfocītus, kas norāda uz audzēja specifiskiem imūnģenētiskiem marķieriem. Turklāt EB3 šūnām bija morfoloģiskas un imunofenotipiskas pazīmes, kas atbilda lielām limfoblastiem līdzīgām Burkita limfomas šūnām, kurām ir tendence uzrādīt spilgtu granulu membrānas krāsojumu, kad tās tiek pakļautas reaģējoša seruma iedarbībai. Šī vēsturiskā EB3 imunoloģiskā profilēšana palīdzēja izveidot pamatu vēlākajiem pētījumiem, kuros tika pētīti limfoīdo ļaundabīgo audzēju audzējiem specifiskie antigēni.

Audums
Bone
Slimība
Burkita limfoma
Metastāžu vieta
Bone
Pieteikumi
3D šūnu kultūras, Imunoloģija
Sinonīmi
  • EB-3
  • Epstein-Barr-3
  • GM04679

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Limfoblasts
Šūnu tips
B limfocīts

04Identifikatori

Atsauce
EB3 (Cytion kataloga numurs 300373)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1185

05Pazīmes un uzņēmība

Virsmas antigēni
HLA A3, Aw32, Cw2
Izoenzīmi
G6PD, A
Vīrusi
EBV (EBNA pozitīvs)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% termiski inaktivētu FBS
Pārstādīšana
Viegli homogenizējiet šūnu suspensiju kolbā, pipetējot uz augšu un uz leju, pēc tam ņemiet reprezentatīvu paraugu, lai noteiktu šūnu blīvumu uz ml. Atšķaidiet suspensiju, lai sasniegtu šūnu koncentrāciju 1 x 105 šūnas/ml ar svaigu kultūras barotni, un sadaliet pielāgoto suspensiju jaunās kolbās turpmākai kultivēšanai.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
3 gadi
Etniskā piederība
Āfrikas