Премини към съдържанието
HEI-OC1
Тъкан
Ухо, вътрешно ухо, кохлея, орган на Корти
Заболяване
Нормален
Синоними
HEIOC1, House Ear Institute-Organ of Corti 1

Документи

HEI-OC1

Cell line · Номер на продукта 305548

The HEI-OC1 cell line, derived from the cochlea of the transgenic Immortomouse, represents a versatile model for studying auditory cell biology, particula...

€550.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия HEI-OC1, получена от кохлеята на трансгенна мишка Immortomouse, представлява универсален модел за изучаване на биологията на слуховите клетки, особено в контекста на ототоксичността и защитните механизми. Клетките HEI-OC1 са условно безсмъртни и притежават характеристиките както на сетивните, така и на поддържащите клетки на органа на Корти. Тези клетки експресират различни маркери на кохлеарните власинкови клетки, включително престин, миозин 7а и калбиндин. Като in vitro модел HEI-OC1 се прилага за изследване на клетъчните реакции към ототоксични лекарства, като аминогликозиди и цисплатин, за които е известно, че предизвикват загуба на слуха чрез апоптоза, натрупване на ROS и митохондриална дисфункция.

Клетките HEI-OC1 са доказали своята полезност при изследването на защитни стратегии срещу ототоксични увреждания. Например проучванията показват, че лизофосфатидовата киселина (ЛПА) може да смекчи цитотоксичните ефекти на цисплатина чрез намаляване на апоптозата, прекомерната автофагия и натрупването на ROS. Освен това е установено, че инхибирането на фероптозата, вид желязозависима клетъчна смърт, предпазва HEI-OC1 клетките от индуцираното от цисплатина увреждане чрез запазване на митохондриалната функция. Прилагането на глюкокортикоиди, като например дексаметазон, също предпазва HEI-OC1 клетките от апоптоза, предизвикана от стрес на ендоплазмения ретикулум, чрез модулиране на пътя PERK-CHOP. Тези констатации потвърждават ролята на HEI-OC1 клетките като ценен модел за скрининг на лекарства за ототоксичност и изследване на отопротективни интервенции.

Тъкан
Ухо, вътрешно ухо, кохлея, орган на Корти
Заболяване
Нормален
Синоними
  • HEIOC1
  • House Ear Institute-Organ of Corti 1

02Класификация

Организъм
Мишка
Секс
Не е посочено
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This HEI-OC1 Immorto Mouse epithelial line contains a temperature-sensitive SV40 large T-antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
2

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител

04Идентификатори

Източник
HEI-OC1 (каталожен номер 305548 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_D899

05Проява и предразположеност

Вируси
Трансформатор: Simian virus 40 (SV40)

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с TrypLE Express, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2Kb-tsA58) Безсмъртни мишки
Възраст на донора
7 дни