Ga naar de inhoud
HEI-OC1
Weefsel
Oor, binnenoor, slakkenhuis, orgaan van Corti
Ziekte
Normaal
Synoniemen
HEIOC1, House Ear Institute-Organ of Corti 1

Documenten

HEI-OC1

Cell line · Productnummer 305548

The HEI-OC1 cell line, derived from the cochlea of the transgenic Immortomouse, represents a versatile model for studying auditory cell biology, particula...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De HEI-OC1 cellijn, afgeleid van het slakkenhuis van de transgene Immortomouse, vormt een veelzijdig model voor het bestuderen van auditieve celbiologie, met name in de context van ototoxiciteit en beschermende mechanismen. HEI-OC1 cellen zijn conditioneel geïmmortaliseerd en vertonen kenmerken van zowel sensorische als ondersteunende cellen van het orgaan van Corti. Deze cellen brengen verschillende cochleaire haarcelmarkers tot expressie, waaronder prestine, myosine 7a en calbindine. Als in vitro model is HEI-OC1 gebruikt om de cellulaire reacties te onderzoeken op ototoxische medicijnen, zoals aminoglycosiden en cisplatine, waarvan bekend is dat ze gehoorverlies veroorzaken door apoptose, ROS-accumulatie en mitochondriale disfunctie.

HEI-OC1 cellen zijn nuttig gebleken bij het onderzoeken van beschermende strategieën tegen ototoxische schade. Studies hebben bijvoorbeeld aangetoond dat lysofosfatinezuur (LPA) de cytotoxische effecten van cisplatine kan verminderen door apoptose, overmatige autofagie en ROS-accumulatie te verminderen. Daarnaast bleek dat de remming van ferroptose, een soort ijzerafhankelijke celdood, HEI-OC1-cellen beschermt tegen cisplatine-geïnduceerde schade door de mitochondriale functie te behouden. De toepassing van glucocorticoïden, zoals dexamethason, bleek HEI-OC1-cellen ook te beschermen tegen endoplasmatische reticulumstress-geïnduceerde apoptose door de PERK-CHOP pathway te moduleren. Deze bevindingen ondersteunen de rol van HEI-OC1 cellen als een waardevol model voor het screenen van geneesmiddelen voor ototoxiciteit en het onderzoeken van otoprotectieve interventies.

Weefsel
Oor, binnenoor, slakkenhuis, orgaan van Corti
Ziekte
Normaal
Synoniemen
  • HEIOC1
  • House Ear Institute-Organ of Corti 1

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Niet gespecificeerd
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This HEI-OC1 Immorto Mouse epithelial line contains a temperature-sensitive SV40 large T-antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HEI-OC1 (Cytion catalogusnummer 305548)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_D899

05Expressie en vatbaarheid

Virussen
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met TrypLE Express, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Meng de cellen na incubatie voorzichtig met 10 ml medium om ze te resuspenderen en centrifugeer vervolgens gedurende 3 minuten bij 300xg. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2Kb-tsA58) Immortomouse
Leeftijd van de donor
7 dagen