HEI-OC1

A linhagem celular HEI-OC1, derivada da cóclea do camundongo transgênico Immortomouse, representa um modelo versátil para o estudo da biologia das células auditivas, particularmente no contexto da ototoxicidade e dos mecanismos de proteção. As células HEI-OC1 são imortalizadas condicionalmente e apresentam características tanto das células sensoriais quanto das células de suporte do órgão de Corti. Essas células expressam vários marcadores de células ciliadas cocleares, incluindo prestina, miosina 7a e calbindina. Como modelo in vitro, o HEI-OC1 tem sido utilizado para investigar as respostas celulares a drogas ototóxicas, como os aminoglicosídeos e a cisplatina, que são conhecidas por induzir perda auditiva por meio de apoptose, acúmulo de ROS e disfunção mitocondrial.

As células HEI-OC1 demonstraram utilidade na exploração de estratégias de proteção contra danos ototóxicos. Por exemplo, estudos mostraram que o ácido lisofosfatídico (LPA) pode atenuar os efeitos citotóxicos da cisplatina ao reduzir a apoptose, a autofagia excessiva e o acúmulo de ROS. Além disso, verificou-se que a inibição da ferroptose, um tipo de morte celular dependente de ferro, protege as células HEI-OC1 dos danos induzidos pela cisplatina, preservando a função mitocondrial. Observou-se também que a aplicação de glicocorticoides, como a dexametasona, protege as células HEI-OC1 da apoptose induzida pelo estresse do retículo endoplasmático, por meio da modulação da via PERK-CHOP. Essas descobertas reforçam o papel das células HEI-OC1 como um modelo valioso para a triagem de medicamentos quanto à ototoxicidade e para a investigação de intervenções otoprotetoras.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.