Tartalomra ugrás
HEI-OC1
Szövet
Fül, belső fül, cochlea, Corti-szerv
Betegség
Normál
Szinonimák
HEIOC1, House Ear Institute-Organ of Corti 1

Dokumentumok

HEI-OC1

Cell line · Termékszám 305548

The HEI-OC1 cell line, derived from the cochlea of the transgenic Immortomouse, represents a versatile model for studying auditory cell biology, particula...

€550.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HEI-OC1 sejtvonal, amely a transzgenikus Immortomouse csigahártyájából származik, sokoldalú modellt jelent a hallósejtek biológiájának tanulmányozására, különösen az ototoxicitás és a védőmechanizmusok összefüggésében. A HEI-OC1 sejtek feltételesen immortalizáltak, és a Corti-szerv szenzoros és támogató sejtjeinek jellemzőit egyaránt mutatják. Ezek a sejtek különböző cochlearis szőrsejtmarkereket expresszálnak, beleértve a presztint, a miozin 7a-t és a kalbindint. In vitro modellként a HEI-OC1-et alkalmazták az ototoxikus gyógyszerekre, például az aminoglikozidokra és a ciszplatinra adott sejtválaszok vizsgálatára, amelyekről ismert, hogy apoptózis, ROS-felhalmozódás és mitokondriális diszfunkció révén halláscsökkenést idéznek elő.

A HEI-OC1 sejtek hasznosnak bizonyultak az ototoxikus károsodással szembeni védelmi stratégiák feltárásában. Vizsgálatok például kimutatták, hogy a lizofoszfatidinsav (LPA) az apoptózis, a túlzott autofágia és a ROS-felhalmozódás csökkentése révén enyhítheti a ciszplatin citotoxikus hatásait. Emellett a vasfüggő sejthalál egy típusának, a ferroptózisnak a gátlása a mitokondriális funkció megőrzésével védi a HEI-OC1 sejteket a ciszplatin által kiváltott károsodástól. A glükokortikoidok, mint például a dexametazon alkalmazása is védi a HEI-OC1 sejteket az endoplazmatikus retikulum stressz által kiváltott apoptózistól a PERK-CHOP útvonal modulálásával. Ezek az eredmények alátámasztják, hogy a HEI-OC1 sejtek értékes modellként szolgálnak a gyógyszerek ototoxicitásának szűrésére és az otoprotektív beavatkozások vizsgálatára.

Szövet
Fül, belső fül, cochlea, Corti-szerv
Betegség
Normál
Szinonimák
  • HEIOC1
  • House Ear Institute-Organ of Corti 1

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nem meghatározott
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This HEI-OC1 Immorto Mouse epithelial line contains a temperature-sensitive SV40 large T-antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű

04Azonosítók

Hivatkozás
HEI-OC1 (Cytion katalógusszám: 305548)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_D899

05Kifejeződés és fogékonyság

Vírusok
Transzformáns: Simian virus 40 (SV40)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen TrypLE Express-szel, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. Hagyjuk a sejteket 8-10 percig szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2Kb-tsA58) halhatatlan egér
Az adományozó életkora
7 nap