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HEI-OC1
Gewebe
Ohr, Innenohr, Cochlea, Corti-Organ
Krankheit
Normal
Synonyme
HEIOC1, House Ear Institute-Organ of Corti 1

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HEI-OC1

Cell line · Artikelnummer 305548

The HEI-OC1 cell line, derived from the cochlea of the transgenic Immortomouse, represents a versatile model for studying auditory cell biology, particula...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die HEI-OC1-Zelllinie, die aus der Cochlea der transgenen Immortomaus stammt, ist ein vielseitiges Modell für die Untersuchung der Biologie auditorischer Zellen, insbesondere im Zusammenhang mit Ototoxizität und Schutzmechanismen. HEI-OC1-Zellen sind bedingt immortalisiert und weisen Merkmale sowohl von Sinnes- als auch von Stützzellen des Corti-Organs auf. Diese Zellen exprimieren verschiedene Haarzellenmarker der Cochlea, darunter Prestin, Myosin 7a und Calbindin. Als In-vitro-Modell wurde HEI-OC1 eingesetzt, um die zellulären Reaktionen auf ototoxische Medikamente wie Aminoglykoside und Cisplatin zu untersuchen, von denen bekannt ist, dass sie durch Apoptose, ROS-Akkumulation und mitochondriale Dysfunktion zu Hörverlust führen.

HEI-OC1-Zellen haben sich bei der Erforschung von Schutzstrategien gegen ototoxische Schäden als nützlich erwiesen. So haben Studien gezeigt, dass Lysophosphatidsäure (LPA) die zytotoxischen Auswirkungen von Cisplatin abschwächen kann, indem sie Apoptose, übermäßige Autophagie und ROS-Akkumulation reduziert. Darüber hinaus wurde festgestellt, dass die Hemmung der Ferroptose, einer Form des eisenabhängigen Zelltods, HEI-OC1-Zellen vor Cisplatin-induzierten Schäden schützt, indem die Mitochondrienfunktion erhalten bleibt. Es wurde auch beobachtet, dass die Gabe von Glukokortikoiden wie Dexamethason HEI-OC1-Zellen vor der durch endoplasmatischen Retikulumstress ausgelösten Apoptose schützt, indem sie den PERK-CHOP-Signalweg moduliert. Diese Ergebnisse unterstützen die Rolle von HEI-OC1-Zellen als wertvolles Modell für das Screening von Medikamenten auf Ototoxizität und die Untersuchung otoprotektiver Maßnahmen.

Gewebe
Ohr, Innenohr, Cochlea, Corti-Organ
Krankheit
Normal
Synonyme
  • HEIOC1
  • House Ear Institute-Organ of Corti 1

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Nicht näher bezeichnet
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This HEI-OC1 Immorto Mouse epithelial line contains a temperature-sensitive SV40 large T-antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich

04Bezeichner

Quellenangabe
HEI-OC1 (Cytion-Katalognummer 305548)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_D899

05Expression und Anfälligkeit

Viren
Transformant: Simian-Virus 40 (SV40)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Verwenden Sie für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml. Bedecken Sie dann die Zellen vollständig mit TrypLE Express, wobei Sie 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwenden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2Kb-tsA58) Immortomouse
Alter des Spenders
7 Tage