Přejít na obsah
HEI-OC1
Tkáň
Ucho, vnitřní ucho, hlemýžď, Cortiho orgán
Nemoc
Normální
Synonyma
HEIOC1, House Ear Institute-Organ of Corti 1

Dokumenty

HEI-OC1

Cell line · Číslo výrobku 305548

The HEI-OC1 cell line, derived from the cochlea of the transgenic Immortomouse, represents a versatile model for studying auditory cell biology, particula...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie HEI-OC1, odvozená z hlemýždě transgenní myši Immortomouse, představuje univerzální model pro studium biologie sluchových buněk, zejména v kontextu ototoxicity a ochranných mechanismů. Buňky HEI-OC1 jsou podmíněně imortalizované a vykazují vlastnosti smyslových i podpůrných buněk Cortiho orgánu. Tyto buňky exprimují různé markery kochleárních vláskových buněk, včetně prestinu, myozinu 7a a kalbindinu. Jako model in vitro byly HEI-OC1 použity ke zkoumání buněčných reakcí na ototoxické léky, jako jsou aminoglykosidy a cisplatina, o nichž je známo, že vyvolávají ztrátu sluchu prostřednictvím apoptózy, akumulace ROS a mitochondriální dysfunkce.

Buňky HEI-OC1 se ukázaly jako užitečné při zkoumání ochranných strategií proti ototoxickému poškození. Studie například ukázaly, že kyselina lysofosfatidová (LPA) může zmírnit cytotoxické účinky cisplatiny snížením apoptózy, nadměrné autofagie a akumulace ROS. Kromě toho bylo zjištěno, že inhibice ferroptózy, typu buněčné smrti závislé na železe, chrání buňky HEI-OC1 před poškozením vyvolaným cisplatinou tím, že zachovává funkci mitochondrií. Bylo také zjištěno, že aplikace glukokortikoidů, jako je dexametazon, chrání buňky HEI-OC1 před apoptózou vyvolanou stresem endoplazmatického retikula modulací dráhy PERK-CHOP. Tato zjištění podporují úlohu HEI-OC1 buněk jako cenného modelu pro screening léčiv z hlediska ototoxicity a zkoumání otoprotektivních zásahů.

Tkáň
Ucho, vnitřní ucho, hlemýžď, Cortiho orgán
Nemoc
Normální
Synonyma
  • HEIOC1
  • House Ear Institute-Organ of Corti 1

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Nespecifikováno
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This HEI-OC1 Immorto Mouse epithelial line contains a temperature-sensitive SV40 large T-antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citace
HEI-OC1 (katalogové číslo Cytion 305548)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_D899

05Exprese a náchylnost

Viry
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem TrypLE Express, a to 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2Kb-tsA58) Immortomouse
Věk dárce
7 dní