Siirry sisältöön
HEI-OC1
Kudos
Korva, sisäkorva, sisäkorva, sisäkorva, Corti-elin
Sairaus
Normaali
Synonyymit
HEIOC1, House Ear Institute-Organ of Corti 1

Asiakirjat

HEI-OC1

Cell line · Tuotenumero 305548

The HEI-OC1 cell line, derived from the cochlea of the transgenic Immortomouse, represents a versatile model for studying auditory cell biology, particula...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Siirtogeenisen Immortomouse-hiiren sisäkorvasta peräisin oleva HEI-OC1-solulinja on monipuolinen malli kuulosolujen biologian tutkimiseen erityisesti ototoksisuuden ja suojamekanismien yhteydessä. HEI-OC1-solut ovat ehdollisesti kuolemattomia, ja niillä on sekä Corti-elimen aisti- että tukisolujen ominaisuuksia. Nämä solut ilmentävät erilaisia sisäkorvan karvasolujen merkkiaineita, kuten prestiiniä, myosiini 7a:ta ja kalbindiinia. In vitro -mallina HEI-OC1-soluja on käytetty tutkimaan solujen vasteita ototoksisille lääkkeille, kuten aminoglykosideille ja sisplatiinille, joiden tiedetään aiheuttavan kuulon heikkenemistä apoptoosin, ROS:n kertymisen ja mitokondrioiden toimintahäiriöiden kautta.

HEI-OC1-solut ovat osoittautuneet hyödyllisiksi ototoksisia vaurioita vastaan suojaavien strategioiden tutkimisessa. Tutkimukset ovat esimerkiksi osoittaneet, että lysofosfatidihappo (LPA) voi lieventää sisplatiinin sytotoksisia vaikutuksia vähentämällä apoptoosia, liiallista autofagiaa ja ROS-kertymistä. Lisäksi ferroptoosin, eräänlaisen raudasta riippuvaisen solukuoleman, estämisen on havaittu suojaavan HEI-OC1-soluja sisplatiinin aiheuttamilta vaurioilta säilyttämällä mitokondrioiden toiminnan. Glukokortikoidien, kuten deksametasonin, käytön on myös havaittu suojaavan HEI-OC1-soluja endoplasmisen verkkokalvostressin aiheuttamalta apoptoosilta moduloimalla PERK-CHOP-reittiä. Nämä havainnot tukevat HEI-OC1-solujen roolia arvokkaana mallina ototoksisten lääkkeiden seulonnassa ja otoprotektiivisten toimenpiteiden tutkimisessa.

Kudos
Korva, sisäkorva, sisäkorva, sisäkorva, Corti-elin
Sairaus
Normaali
Synonyymit
  • HEIOC1
  • House Ear Institute-Organ of Corti 1

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This HEI-OC1 Immorto Mouse epithelial line contains a temperature-sensitive SV40 large T-antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen

04Tunnisteet

Lähdeviite
HEI-OC1 (Cytionin luettelonumero 305548)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_D899

05Ilmentyminen ja alttius

Virukset
Transformantti: Simian virus 40 (SV40)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan TrypLE Express -valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen sekoita solut varovasti 10 ml:lla elatusainetta niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoi sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2Kb-tsA58) Kuolematon hiiri
Luovuttajan ikä
7 päivää