Przejdź do treści
HEI-OC1
Chusteczka
Ucho, ucho wewnętrzne, ślimak, narząd Cortiego
Choroba
Normalny
Synonimy
HEIOC1, House Ear Institute-Organ of Corti 1

Dokumenty

HEI-OC1

Cell line · Numer produktu 305548

The HEI-OC1 cell line, derived from the cochlea of the transgenic Immortomouse, represents a versatile model for studying auditory cell biology, particula...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa HEI-OC1, pochodząca ze ślimaka transgenicznej myszy nieśmiertelnej, stanowi wszechstronny model do badania biologii komórek słuchowych, szczególnie w kontekście ototoksyczności i mechanizmów ochronnych. Komórki HEI-OC1 są warunkowo unieśmiertelnione i wykazują cechy zarówno komórek czuciowych, jak i podporowych narządu Cortiego. Komórki te wykazują ekspresję różnych markerów komórek włoskowatych ślimaka, w tym prestyny, miozyny 7a i kalbindyny. Jako model in vitro, HEI-OC1 został zastosowany do badania odpowiedzi komórkowej na leki ototoksyczne, takie jak aminoglikozydy i cisplatyna, o których wiadomo, że wywołują utratę słuchu poprzez apoptozę, akumulację ROS i dysfunkcję mitochondriów.

Komórki HEI-OC1 wykazały przydatność w badaniu strategii ochronnych przed uszkodzeniami ototoksycznymi. Na przykład badania wykazały, że kwas lizofosfatydowy (LPA) może łagodzić cytotoksyczne działanie cisplatyny poprzez zmniejszenie apoptozy, nadmiernej autofagii i akumulacji ROS. Ponadto stwierdzono, że hamowanie ferroptazy, rodzaju śmierci komórkowej zależnej od żelaza, chroni komórki HEI-OC1 przed uszkodzeniem wywołanym cisplatyną poprzez zachowanie funkcji mitochondriów. Zaobserwowano również, że stosowanie glukokortykoidów, takich jak deksametazon, chroni komórki HEI-OC1 przed apoptozą wywołaną stresem retikulum endoplazmatycznego poprzez modulację szlaku PERK-CHOP. Odkrycia te potwierdzają rolę komórek HEI-OC1 jako cennego modelu do badań przesiewowych leków pod kątem ototoksyczności i badania interwencji otoprotekcyjnych.

Chusteczka
Ucho, ucho wewnętrzne, ślimak, narząd Cortiego
Choroba
Normalny
Synonimy
  • HEIOC1
  • House Ear Institute-Organ of Corti 1

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Nieokreślone
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This HEI-OC1 Immorto Mouse epithelial line contains a temperature-sensitive SV40 large T-antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka

04Identyfikatory

Źródło
HEI-OC1 (numer katalogowy Cytion 305548)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_D899

05Ekspresja i podatność

Wirusy
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki preparatem TrypLE Express, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozostawić komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut w celu ich odłączenia. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2Kb-tsA58) Immortomouse
Wiek dawcy
7 dni