Vai al contenuto
HEI-OC1
Tessuto
Orecchio, orecchio interno, coclea, organo di Corti
Malattia
Normale
Sinonimi
HEIOC1, House Ear Institute-Organ of Corti 1

Documenti

HEI-OC1

Cell line · Codice prodotto 305548

The HEI-OC1 cell line, derived from the cochlea of the transgenic Immortomouse, represents a versatile model for studying auditory cell biology, particula...

€550.00IVA e spese di spedizione escluse
Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare HEI-OC1, derivata dalla coclea dell'Immortomouse transgenico, rappresenta un modello versatile per lo studio della biologia delle cellule uditive, in particolare nel contesto dell'ototossicità e dei meccanismi protettivi. Le cellule HEI-OC1 sono immortalizzate in modo condizionale e presentano caratteristiche di cellule sensoriali e di supporto dell'organo del Corti. Queste cellule esprimono vari marcatori delle cellule ciliate cocleari, tra cui prestina, miosina 7a e calbindina. Come modello in vitro, le HEI-OC1 sono state utilizzate per studiare le risposte cellulari ai farmaci ototossici, come gli aminoglicosidi e il cisplatino, noti per indurre la perdita dell'udito attraverso l'apoptosi, l'accumulo di ROS e la disfunzione mitocondriale.

Le cellule HEI-OC1 hanno dimostrato la loro utilità nell'esplorare strategie protettive contro i danni ototossici. Ad esempio, alcuni studi hanno dimostrato che l'acido lisofosfatidico (LPA) può attenuare gli effetti citotossici del cisplatino riducendo l'apoptosi, l'eccesso di autofagia e l'accumulo di ROS. Inoltre, l'inibizione della ferroptosi, un tipo di morte cellulare dipendente dal ferro, è risultata in grado di proteggere le cellule HEI-OC1 dai danni indotti dal cisplatino, preservando la funzione mitocondriale. È stato inoltre osservato che l'applicazione di glucocorticoidi, come il desametasone, protegge le cellule HEI-OC1 dall'apoptosi indotta dallo stress del reticolo endoplasmatico, modulando la via PERK-CHOP. Questi risultati supportano il ruolo delle cellule HEI-OC1 come modello prezioso per lo screening di farmaci per l'ototossicità e lo studio di interventi otoprotettivi.

Tessuto
Orecchio, orecchio interno, coclea, organo di Corti
Malattia
Normale
Sinonimi
  • HEIOC1
  • House Ear Institute-Organ of Corti 1

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Non specificato
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This HEI-OC1 Immorto Mouse epithelial line contains a temperature-sensitive SV40 large T-antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HEI-OC1 (numero di catalogo Cytion 305548)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_D899

05Espressione e suscettibilità

Virus
Trasformante: Simian virus 40 (SV40)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con TrypLE Express, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2Kb-tsA58) Immortomouse
Età dei donatori
7 giorni