Mine otse sisu juurde
HEI-OC1
Kude
Kõrv, sisekõrv, sisekõrv, Corti organ
Haigus
Tavaline
Sünonüümid
HEIOC1, House Ear Institute-Organ of Corti 1

Dokumendid

HEI-OC1

Cell line · Toote number 305548

The HEI-OC1 cell line, derived from the cochlea of the transgenic Immortomouse, represents a versatile model for studying auditory cell biology, particula...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Transgeense Immortomouse'i sisekõrvastikust saadud rakuliin HEI-OC1 on mitmekülgne mudel kuulmisrakkude bioloogia uurimiseks, eriti ototoksilisuse ja kaitsemehhanismide kontekstis. HEI-OC1 rakud on tinglikult immortaliseeritud ja neil on nii Corti organi sensoorsete kui ka tugirakkude omadused. Need rakud ekspresseerivad erinevaid sisekõrva karvarakkude markereid, sealhulgas prestiin, müosiin 7a ja kalbindiin. In vitro mudelina on HEI-OC1 kasutatud rakkude reaktsiooni uurimiseks ototoksilistele ravimitele, nagu aminoglükosiidid ja tsisplatiin, mis teadaolevalt põhjustavad kuulmislangust apoptoosi, ROSi kogunemise ja mitokondriaalse düsfunktsiooni kaudu.

HEI-OC1 rakud on osutunud kasulikuks ototoksiliste kahjustuste eest kaitsvate strateegiate uurimisel. Näiteks on uuringud näidanud, et lüsofosfatiinhape (LPA) võib leevendada tsisplatiini tsütotoksilist mõju, vähendades apoptoosi, liigset autofaagiat ja ROSi akumuleerumist. Lisaks on leitud, et ferroptoosi (rauast sõltuva rakusurma tüüp) inhibeerimine kaitseb HEI-OC1 rakke tsisplatiinist põhjustatud kahjustuste eest, säilitades mitokondriaalse funktsiooni. Samuti on täheldatud, et glükokortikoidide, nagu deksametasoon, kasutamine kaitseb HEI-OC1 rakke endoplasmilise retikulumi stressist põhjustatud apoptoosi eest, moduleerides PERK-CHOP rada. Need leiud toetavad HEI-OC1 rakkude rolli väärtusliku mudelina ravimite ototoksilisuse skriininguks ja otoprotektiivsete sekkumiste uurimiseks.

Kude
Kõrv, sisekõrv, sisekõrv, Corti organ
Haigus
Tavaline
Sünonüümid
  • HEIOC1
  • House Ear Institute-Organ of Corti 1

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This HEI-OC1 Immorto Mouse epithelial line contains a temperature-sensitive SV40 large T-antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
HEI-OC1 (Cytioni katalooginumber 305548)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_D899

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
Transformant: simian virus 40 (SV40)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult TrypLE Expressiga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeeruda 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2Kb-tsA58) Immortomouse
Doonori vanus
7 päeva