Preskoči na vsebino
HEI-OC1
Tkivo
Uho, notranje uho, polža, Cortijev organ
Bolezen
Normalno
Sinonimi
HEIOC1, House Ear Institute-Organ of Corti 1

Dokumenti

HEI-OC1

Cell line · Številka izdelka 305548

The HEI-OC1 cell line, derived from the cochlea of the transgenic Immortomouse, represents a versatile model for studying auditory cell biology, particula...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija HEI-OC1, pridobljena iz polža transgene miši Immortomouse, je vsestranski model za preučevanje biologije slušnih celic, zlasti v okviru ototoksičnosti in zaščitnih mehanizmov. Celice HEI-OC1 so pogojno nesmrtne in imajo značilnosti senzoričnih in podpornih celic Cortijevega organa. Te celice izražajo različne označevalce polževega vlakna, vključno s prestinom, miozinom 7a in kalbindinom. HEI-OC1 se kot model in vitro uporablja za raziskovanje celičnih odzivov na ototoksična zdravila, kot so aminoglikozidi in cisplatin, za katera je znano, da povzročajo izgubo sluha zaradi apoptoze, kopičenja ROS in mitohondrijske disfunkcije.

Celice HEI-OC1 so se izkazale za uporabne pri raziskovanju zaščitnih strategij proti ototoksičnim poškodbam. Študije so na primer pokazale, da lahko lizofosfatidna kislina (LPA) ublaži citotoksične učinke cisplatina z zmanjšanjem apoptoze, prekomerne avtofagije in kopičenja ROS. Poleg tega je bilo ugotovljeno, da zaviranje feroptoze, vrste od železa odvisne celične smrti, ščiti celice HEI-OC1 pred poškodbami, ki jih povzroča cisplatin, saj ohranja mitohondrijsko funkcijo. Ugotovljeno je bilo tudi, da uporaba glukokortikoidov, kot je deksametazon, ščiti celice HEI-OC1 pred apoptozo, ki jo povzroča stres endoplazemskega retikuluma, z modulacijo poti PERK-CHOP. Te ugotovitve potrjujejo vlogo celic HEI-OC1 kot dragocenega modela za presejanje zdravil glede ototoksičnosti in raziskovanje otozaščitnih ukrepov.

Tkivo
Uho, notranje uho, polža, Cortijev organ
Bolezen
Normalno
Sinonimi
  • HEIOC1
  • House Ear Institute-Organ of Corti 1

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This HEI-OC1 Immorto Mouse epithelial line contains a temperature-sensitive SV40 large T-antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni

04Identifikatorji

Navajanje vira
HEI-OC1 (kataloška številka Cytion 305548)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_D899

05Izražanje in dovzetnost

Virusi
Transformant: Simijanski virus 40 (SV40)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice v celoti prekrijte z raztopino TrypLE Express, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2Kb-tsA58) Immortomouse
Starost darovalca
7 dni