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DSL-6B-C2
Gewebe
Bauchspeicheldrüse
Krankheit
Karzinom
Metastasenherd
Duktal
Synonyme
DSL-6B/C2, DSL6B/C2

Dokumente

DSL-6B-C2

Cell line · Artikelnummer 500167

The DSL-6B/C2 cell line is derived from the DSL-6 transplantable acinar cell carcinoma of the pancreas, specifically established from a tumor model in a m...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die DSL-6B/C2-Zelllinie stammt vom transplantierbaren DSL-6-Azinuszellkarzinom der Bauchspeicheldrüse ab, das speziell aus einem Tumormodell bei einer männlichen Lewis-Ratte entwickelt wurde. Dieses Modell wurde 1986 aus einem primären Azinuszellkarzinom entwickelt, das sich nach intraperitonealer Verabreichung von Azaserin, einem starken Karzinogen, entwickelte. Die Bedeutung dieser Zelllinie ergibt sich aus ihrem Ursprung in der Bauchspeicheldrüsenkrebsforschung, was ihre Nützlichkeit bei der Untersuchung der Biologie und der zugrundeliegenden Mechanismen von Azinuszellkarzinomen des Pankreas unterstreicht.

Nach der Etablierung in der Kultur zeigten DSL-6B/C2-Zellen zunächst die charakteristische Produktion von Amylase, ein Kennzeichen der exokrinen Funktion des Pankreas. Diese exokrine Enzymproduktion war jedoch nur vorübergehend und hörte innerhalb von ein bis zwei Wochen nach der Kultur auf. Diese Veränderung der phänotypischen Ausprägung ist insofern bemerkenswert, als sie auf eine Anpassung an die In-vitro-Umgebung hindeutet, die den Nutzen der Zellen in bestimmten Arten von biologischen Tests beeinträchtigen kann. Der Verlust der Amylaseproduktion könnte auch Veränderungen in der Zelldifferenzierung oder die Entstehung von Subpopulationen innerhalb der kultivierten Zellen widerspiegeln, was für Forscher, die sich mit der Entwicklung von Tumorzellmerkmalen in vitro befassen, entscheidend sein könnte.

Gewebe
Bauchspeicheldrüse
Krankheit
Karzinom
Metastasenherd
Duktal
Synonyme
  • DSL-6B/C2
  • DSL6B/C2

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Azinuszellen
Tumorauslösend
Ja, in Lewis-Ratten bilden die Zellen solide Tumore und teilweise zystische Tumore mit einem gemischten Phänotyp aus Plattenepithel-, Schleimhaut- und Drüsenbereichen

04Bezeichner

Quellenangabe
DSL-6B-C2 (Cytion-Katalognummer 500167)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_4167

05Expression und Anfälligkeit

Produkte
Muzin

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm² ergeben in etwa 4 Tagen eine konfluente Schicht.
Flüssigkeitswechsel
2 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
Lewis
Alter des Spenders
2 Jahre