Siirry sisältöön
DSL-6B-C2
Kudos
Haima
Sairaus
Syöpä
Metastaasikohde
Ductal
Synonyymit
DSL-6B/C2, DSL6B/C2

Asiakirjat

DSL-6B-C2

Cell line · Tuotenumero 500167

The DSL-6B/C2 cell line is derived from the DSL-6 transplantable acinar cell carcinoma of the pancreas, specifically established from a tumor model in a m...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

DSL-6B/C2-solulinja on peräisin DSL-6-siirrettävissä olevasta haiman acinarisolusyövästä, joka on nimenomaan perustettu urospuolisen Lewisin rotan kasvainmallista. Tämä malli aloitettiin vuonna 1986 primaarisesta acinarisolusyövästä, joka kehittyi voimakkaan karsinogeenin atsaseriinin vatsansisäisen annon jälkeen. Tämän solulinjan merkitys johtuu siitä, että se on peräisin haimasyövän tutkimuksesta, mikä korostaa sen hyödyllisyyttä haiman acinussolusyöpien biologian ja niiden taustalla olevien mekanismien tutkimisessa.

Aluksi DSL-6B/C2-solut tuottivat viljelyn jälkeen tyypillistä amylaasia, joka on haiman eksokriinisen toiminnan tunnusmerkki. Tämä eksokriinisen entsyymin tuotanto oli kuitenkin ohimenevää, sillä se lakkasi yhden tai kahden viikon kuluessa viljelystä. Tämä muutos fenotyyppisessä ilmentymisessä on huomattava, koska se viittaa sopeutumiseen in vitro -ympäristöön, mikä voi vaikuttaa solujen käyttökelpoisuuteen tietyntyyppisissä biologisissa kokeissa. Amylaasituotannon häviäminen saattaa myös heijastaa muutoksia solujen erilaistumisessa tai viljeltyjen solujen sisällä syntyvien alaryhmien syntymistä, mikä voi olla ratkaisevaa tutkijoille, jotka keskittyvät kasvainsolujen ominaisuuksien kehittymiseen in vitro.

Kudos
Haima
Sairaus
Syöpä
Metastaasikohde
Ductal
Synonyymit
  • DSL-6B/C2
  • DSL6B/C2

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Akinarisolut
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, Lewisin rotilla solut tuottavat kiinteitä kasvaimia ja osittain kystisiä kasvaimia, jotka koostuvat levyepiteelisistä, limakalvoisista ja rauhasmaisista alueista koostuvasta sekafenotyypistä

04Tunnisteet

Lähdeviite
DSL-6B-C2 (Cytionin luettelonumero 500167)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_4167

05Ilmentyminen ja alttius

Tuotteet
Mucin

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2 tuottaa konfluenttisen kerroksen noin 4 päivässä.
Nesteen uusiminen
2 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Lewis
Luovuttajan ikä
2 vuotta