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DSL-6B-C2
Pañuelo de papel
Páncreas
Enfermedad
Carcinoma
Lugar de metástasis
Ductal
Sinónimos
DSL-6B/C2, DSL6B/C2

Documentos

DSL-6B-C2

Cell line · Número de producto 500167

The DSL-6B/C2 cell line is derived from the DSL-6 transplantable acinar cell carcinoma of the pancreas, specifically established from a tumor model in a m...

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01Información general

Descripción

La línea celular DSL-6B/C2 se deriva del carcinoma transplantable de células acinares del páncreas DSL-6, establecido específicamente a partir de un modelo tumoral en una rata Lewis macho. Este modelo se inició en 1986 a partir de un carcinoma primario de células acinares que se desarrolló tras la administración intraperitoneal de azaserina, un potente carcinógeno. La importancia de esta línea celular radica en su origen en la investigación del cáncer de páncreas, destacando su utilidad en el estudio de la biología y los mecanismos subyacentes de los carcinomas de células acinares pancreáticas.

Inicialmente, al establecerse en cultivo, las células DSL-6B/C2 mostraban la producción característica de amilasa, un sello distintivo de la función exocrina pancreática. Sin embargo, esta producción de enzimas exocrinas fue transitoria, cesando en una o dos semanas de cultivo. Este cambio en la expresión fenotípica es notable, ya que sugiere una adaptación al entorno in vitro, que puede afectar a la utilidad de las células en ciertos tipos de ensayos biológicos. La pérdida de producción de amilasa también podría reflejar cambios en la diferenciación celular o la aparición de subpoblaciones dentro de las células cultivadas, lo que podría ser fundamental para los investigadores que se centran en la evolución de las características de las células tumorales in vitro.

Pañuelo de papel
Páncreas
Enfermedad
Carcinoma
Lugar de metástasis
Ductal
Sinónimos
  • DSL-6B/C2
  • DSL6B/C2

02Clasificación

Organismo
Rata
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células acinares
Tumorigénico
Sí, en ratas Lewis las células producen tumores sólidos y tumores parcialmente quísticos compuestos con un fenotipo mixto de áreas escamosas, mucinosas y glandulares

04Identificadores

Referencia
DSL-6B-C2 (número de catálogo 500167 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4167

05Expresión y susceptibilidad

Productos
Mucina

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2 producirán una capa confluente en aproximadamente 4 días.
Renovación de fluidos
2 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
Lewis
Edad del donante
2 años