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DSL-6B-C2
Tecido
Pâncreas
Doença
Carcinoma
Local da metástase
Ductal
Sinónimos
DSL-6B/C2, DSL6B/C2

Documentos

DSL-6B-C2

Cell line · Número do produto 500167

The DSL-6B/C2 cell line is derived from the DSL-6 transplantable acinar cell carcinoma of the pancreas, specifically established from a tumor model in a m...

€430.00sem impostos nem portes de envio
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01Informações gerais

Descrição

A linha celular DSL-6B/C2 é derivada do carcinoma de células acinares transplantáveis DSL-6 do pâncreas, especificamente estabelecido a partir de um modelo de tumor num rato Lewis macho. Este modelo foi iniciado em 1986 a partir de um carcinoma primário de células acinares que se desenvolveu após a administração intraperitoneal de azaserina, um potente carcinogéneo. A importância desta linha celular decorre da sua origem na investigação do cancro pancreático, destacando a sua utilidade no estudo da biologia e dos mecanismos subjacentes aos carcinomas de células acinares pancreáticas.

Inicialmente, após o estabelecimento em cultura, as células DSL-6B/C2 exibiram a produção caraterística de amilase, uma marca registada da função exócrina pancreática. No entanto, esta produção de enzimas exócrinas era transitória, cessando ao fim de uma a duas semanas de cultura. Esta alteração na expressão fenotípica é notável, uma vez que sugere uma adaptação ao ambiente in vitro, o que pode afetar a utilidade das células em determinados tipos de ensaios biológicos. A perda de produção de amilase pode também refletir alterações na diferenciação celular ou o aparecimento de subpopulações dentro das células cultivadas, o que pode ser crítico para os investigadores que se debruçam sobre a evolução das caraterísticas das células tumorais in vitro.

Tecido
Pâncreas
Doença
Carcinoma
Local da metástase
Ductal
Sinónimos
  • DSL-6B/C2
  • DSL6B/C2

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células acinares
Tumorigénico
Sim, em ratos Lewis, as células produzem tumores sólidos e tumores parcialmente císticos compostos por um fenótipo misto de áreas escamosas, mucinosas e glandulares

04Identificadores

Referência
DSL-6B-C2 (número de catálogo Cytion 500167)
Número de identificação fiscal do NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4167

05Expressão e suscetibilidade

Produtos
Mucina

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm² produzirá uma camada confluente em cerca de 4 dias
Renovação de fluidos
2 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
Lewis
Idade do dador
2 anos