Pāriet uz saturu
DSL-6B-C2
Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Karcinoma
Metastāžu vieta
Duktāls
Sinonīmi
DSL-6B/C2, DSL6B/C2

Dokumenti

DSL-6B-C2

Cell line · Preces numurs 500167

The DSL-6B/C2 cell line is derived from the DSL-6 transplantable acinar cell carcinoma of the pancreas, specifically established from a tumor model in a m...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

DSL-6B/C2 šūnu līnija ir iegūta no aizkuņģa dziedzera akināro šūnu karcinomas DSL-6, kas ir īpaši izveidota, izmantojot Lewis žurkas tēviņa audzēja modeli. Šis modelis tika izveidots 1986. gadā no primārās acināro šūnu karcinomas, kas attīstījās pēc spēcīga kancerogēna azaserīna intraperitoneālas ievadīšanas. Šīs šūnu līnijas nozīme ir saistīta ar tās izcelsmi aizkuņģa dziedzera vēža pētījumos, uzsverot tās lietderību aizkuņģa dziedzera acināro šūnu karcinomu bioloģijas un pamatmehānismu izpētē.

Sākotnēji, izveidojot kultūru, DSL-6B/C2 šūnām bija raksturīga amilazes, kas ir raksturīga aizkuņģa dziedzera eksokrīnās funkcijas pazīme, ražošana. Tomēr šī eksokrīno enzīmu ražošana bija īslaicīga, un tā pārtrūka vienas līdz divu nedēļu laikā pēc kultivēšanas. Šī fenotipiskās ekspresijas maiņa ir ievērojama, jo tā liecina par pielāgošanos in vitro videi, kas var ietekmēt šūnu lietderību dažāda veida bioloģiskajos testos. Amilāzes produkcijas zudums varētu atspoguļot arī šūnu diferenciācijas izmaiņas vai subpopulāciju veidošanos kultivētajās šūnās, kas varētu būt ļoti svarīgi pētniekiem, kuri pievēršas audzēja šūnu īpašību attīstībai in vitro.

Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Karcinoma
Metastāžu vieta
Duktāls
Sinonīmi
  • DSL-6B/C2
  • DSL6B/C2

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Acīndziedzera šūnas
Tumorogēns
Jā, Lewisa žurkām šūnas rada cietus audzējus un daļēji cistiskus audzējus ar jauktu fenotipu - plakanas, gļotādas un dziedzeru zonas

04Identifikatori

Atsauce
DSL-6B-C2 (Cytion kataloga numurs 500167)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_4167

05Pazīmes un uzņēmība

Produkti
Mucīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2 veidos konfluentu slāni apmēram 4 dienu laikā.
Šķidruma atjaunošana
2 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Lewis
Donora vecums
2 gadi