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DSL-6B-C2
Tessuto
Pancreas
Malattia
Carcinoma
Sito metastatico
Duttale
Sinonimi
DSL-6B/C2, DSL6B/C2

Documenti

DSL-6B-C2

Cell line · Codice prodotto 500167

The DSL-6B/C2 cell line is derived from the DSL-6 transplantable acinar cell carcinoma of the pancreas, specifically established from a tumor model in a m...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare DSL-6B/C2 deriva dal carcinoma a cellule acinari del pancreas trapiantabile DSL-6, specificamente creato da un modello tumorale in un ratto Lewis maschio. Questo modello è stato avviato nel 1986 da un carcinoma primario a cellule acinari che si è sviluppato dopo la somministrazione intraperitoneale di azaserina, un potente cancerogeno. L'importanza di questa linea cellulare deriva dalla sua origine nella ricerca sul cancro del pancreas, evidenziando la sua utilità nello studio della biologia e dei meccanismi alla base dei carcinomi a cellule acinari del pancreas.

Inizialmente, al momento della messa in coltura, le cellule DSL-6B/C2 mostravano la caratteristica produzione di amilasi, un segno distintivo della funzione esocrina del pancreas. Tuttavia, questa produzione di enzimi esocrini era transitoria e cessava entro una o due settimane di coltura. Questo cambiamento nell'espressione fenotipica è degno di nota perché suggerisce un adattamento all'ambiente in vitro, che potrebbe influenzare l'utilità delle cellule in alcuni tipi di saggi biologici. La perdita della produzione di amilasi potrebbe anche riflettere cambiamenti nella differenziazione cellulare o l'emergere di sottopopolazioni all'interno delle cellule coltivate, che potrebbero essere fondamentali per i ricercatori che si concentrano sull'evoluzione delle caratteristiche delle cellule tumorali in vitro.

Tessuto
Pancreas
Malattia
Carcinoma
Sito metastatico
Duttale
Sinonimi
  • DSL-6B/C2
  • DSL6B/C2

02Classificazione

Organismo
Ratto
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Cellule acinari
Tumorigenico
Sì, nei ratti di Lewis le cellule producono tumori solidi e parzialmente cistici composti da un fenotipo misto di aree squamose, mucinose e ghiandolari

04Identificatori

Riferimento bibliografico
DSL-6B-C2 (numero di catalogo Cytion 500167)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4167

05Espressione e suscettibilità

Prodotti
Mucina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2 produrrà uno strato confluente in circa 4 giorni
Rinnovo dei fluidi
2 volte a settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
Lewis
Età dei donatori
2 anni