Ga naar de inhoud
DSL-6B-C2
Weefsel
Alvleesklier
Ziekte
Carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Ductaal
Synoniemen
DSL-6B/C2, DSL6B/C2

Documenten

DSL-6B-C2

Cell line · Productnummer 500167

The DSL-6B/C2 cell line is derived from the DSL-6 transplantable acinar cell carcinoma of the pancreas, specifically established from a tumor model in a m...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De DSL-6B/C2-cellijn is afgeleid van het DSL-6 transplanteerbaar acinaircelcarcinoom van de alvleesklier, dat specifiek is vastgesteld op basis van een tumormodel in een mannelijke Lewis rat. Dit model is in 1986 ontstaan uit een primair acinaircelcarcinoom dat zich ontwikkelde na intraperitoneale toediening van azaserine, een krachtig carcinogeen. Het belang van deze cellijn komt voort uit het feit dat ze haar oorsprong vindt in onderzoek naar alvleesklierkanker, waarbij haar nut voor het bestuderen van de biologie en onderliggende mechanismen van alvleeskliercelcarcinomen benadrukt wordt.

In eerste instantie, na vestiging in kweek, vertoonden DSL-6B/C2-cellen de karakteristieke productie van amylase, een kenmerk van de exocriene functie van de alvleesklier. Deze exocriene enzymproductie was echter van voorbijgaande aard en stopte binnen één tot twee weken na de kweek. Deze verandering in de fenotypische expressie is opmerkelijk omdat het een aanpassing aan de in vitro omgeving suggereert, wat de bruikbaarheid van de cellen in bepaalde soorten biologische testen kan beïnvloeden. Het verlies van amylaseproductie zou ook veranderingen in celdifferentiatie of het ontstaan van subpopulaties binnen de gekweekte cellen kunnen weerspiegelen, wat van cruciaal belang zou kunnen zijn voor onderzoekers die zich richten op de evolutie van tumorcelkenmerken in vitro.

Weefsel
Alvleesklier
Ziekte
Carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Ductaal
Synoniemen
  • DSL-6B/C2
  • DSL6B/C2

02Classificatie

Organisme
Rat
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Acinare cellen
Tumorverwekkend
Ja, in Lewis ratten produceren de cellen vaste tumoren en gedeeltelijk cysteuze tumoren met een gemengd fenotype van squameuze, mucineuze en glandulaire gebieden

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
DSL-6B-C2 (Cytion catalogusnummer 500167)
NCBI-belastingnummer
10116
Cellosaurus
CVCL_4167

05Expressie en vatbaarheid

Producten
Mucine

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2 zal in ongeveer 4 dagen een confluente laag opleveren.
Vloeistofverversing
2 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
Lewis
Leeftijd van de donor
2 jaar