Zum Inhalt springen
EA.hy926
Gewebe
Umbilikalvene, Gefäßendothel
Synonyme
EA. hy 926, EA hy 926, EA-hy926, EAhy 926, EAHY-926, EA.Hy926, EA.hy926, EAhy926, EaHy926, Eahy926

Dokumente

EA.hy926

Cell line · Artikelnummer 305034

EA.hy926 cells, are a somatic hybrid cell line widely used in cardiovascular disease research. They are employed in studying various aspects of endothelia...

€650.00zzgl. MwSt. und Versandkosten
Auf Lager
Charge
Empfohlen (frischeste Charge)
  • CoA
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

EA.hy926-Zellen sind eine somatische Hybridzelllinie, die in der Forschung zu Herz-Kreislauf-Erkrankungen weit verbreitet ist. Sie werden zur Untersuchung verschiedener Aspekte der Endothelzellfunktionen im Zusammenhang mit Angiogenese, Homöostase/Thrombose, Blutdruckregulation und Entzündung eingesetzt.

Die zytoplasmatische Verteilung von Weibel-Palade-Körpern und gewebespezifischen Organellen in EA.hy926-Zellen, wie sie in elektronenmikroskopischen Aufnahmen zu sehen ist, spiegelt ihre differenzierten Endothelzellfunktionen wider. Einer der entscheidenden Vorteile von EA.hy926-Zellen ist ihre Fähigkeit, mehr als 100 Populationsverdoppelungen (PDLs) zu durchlaufen und dabei ihre zellulären Eigenschaften beizubehalten.

Diese Langlebigkeit gewährleistet eine nachhaltige und konsistente Zellquelle für langfristige Experimente und Untersuchungen. Mit einer Verdopplungszeit von 12 Stunden weisen diese Zellen eine schnelle Proliferation auf, was experimentelle Arbeitsabläufe erleichtert und eine effiziente Erzeugung der für groß angelegte Studien erforderlichen Zellmengen ermöglicht.

EA.hy926-Zellen haben sich in der kardiovaskulären Forschung als bahnbrechend erwiesen, insbesondere bei der Aufreinigung des Endothelin Converting Enzyms (ECE). Bisher war es schwierig, primäre Endothelzellen in großen Mengen zu erhalten, was die Reinigung von ECE behindert hat.

EA.hy926-Zellen, die aus transformierten menschlichen Nabelvenen-Endothelzellen gewonnen werden, haben sich jedoch als zuverlässige Alternative für die Untersuchung der ECE-Aktivität erwiesen. Dieser Durchbruch hat neue Möglichkeiten für die Untersuchung der Rolle der ECE bei Herz-Kreislauf-Erkrankungen und die Entwicklung potenzieller therapeutischer Maßnahmen eröffnet.

Gewebe
Umbilikalvene, Gefäßendothel
Synonyme
  • EA. hy 926
  • EA hy 926
  • EA-hy926
  • EAhy 926
  • EAHY-926
  • EA.Hy926
  • EA.hy926
  • EAhy926
  • EaHy926
  • Eahy926

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Endothelium
Verdopplungszeit
12 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
EA.hy926 (Cytion-Katalognummer 305034)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_3901

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.