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EA.hy926
Tecido
Veia umbilical, endotélio vascular
Sinónimos
EA. hy 926, EA hy 926, EA-hy926, EAhy 926, EAHY-926, EA.Hy926, EA.hy926, EAhy926, EaHy926, Eahy926

Documentos

EA.hy926

Cell line · Número do produto 305034

EA.hy926 cells, are a somatic hybrid cell line widely used in cardiovascular disease research. They are employed in studying various aspects of endothelia...

€650.00sem impostos nem portes de envio
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1

01Informações gerais

Descrição

As células EA.hy926 são uma linha celular híbrida somática amplamente utilizada na investigação de doenças cardiovasculares. São utilizadas no estudo de vários aspectos das funções das células endoteliais relacionadas com a angiogénese, a homeostase/trombose, a regulação da pressão arterial e a inflamação.

A distribuição citoplasmática dos corpos de Weibel-Palade e dos organelos específicos dos tecidos nas células EA.hy926, tal como observada através de fotomicrografias electrónicas, reflecte as suas funções de células endoteliais diferenciadas. Uma das vantagens críticas das células EA.hy926 é a sua capacidade de sofrer mais de 100 duplicações da população (PDL), mantendo as suas propriedades celulares.

Esta longevidade assegura uma fonte de células sustentável e consistente para experiências e investigações a longo prazo. Com um tempo de duplicação de 12 horas, estas células apresentam uma proliferação rápida, facilitando os fluxos de trabalho experimentais e permitindo a geração eficiente de quantidades de células necessárias para estudos em grande escala.

As células EA.hy926 provaram ser um fator de mudança na investigação cardiovascular, particularmente na purificação da enzima de conversão da endotelina (ECE). Tradicionalmente, a obtenção de células endoteliais primárias em quantidades significativas tem sido um desafio, dificultando a santificação da ECE.

No entanto, as células EA.hy926, derivadas de células endoteliais transformadas da veia umbilical humana, surgiram como uma alternativa fiável para o estudo da atividade da ECE. Esta descoberta abriu novas possibilidades para investigar o papel das ECE nas doenças cardiovasculares e desenvolver potenciais intervenções terapêuticas.

Tecido
Veia umbilical, endotélio vascular
Sinónimos
  • EA. hy 926
  • EA hy 926
  • EA-hy926
  • EAhy 926
  • EAHY-926
  • EA.Hy926
  • EA.hy926
  • EAhy926
  • EaHy926
  • Eahy926

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Endotelial
Tempo de duplicação
12 horas

04Identificadores

Referência
EA.hy926 (número de catálogo da Cytion 305034)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3901

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.