Pāriet uz saturu
EA.hy926
Audums
Umbilikālā vēna, asinsvadu endotēlijs
Sinonīmi
EA. hy 926, EA hy 926, EA-hy926, EAhy 926, EAHY-926, EA.Hy926, EA.hy926, EAhy926, EaHy926, Eahy926

Dokumenti

EA.hy926

Cell line · Preces numurs 305034

EA.hy926 cells, are a somatic hybrid cell line widely used in cardiovascular disease research. They are employed in studying various aspects of endothelia...

€650.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

EA.hy926 šūnas ir somatisko hibrīdu šūnu līnija, ko plaši izmanto sirds un asinsvadu slimību pētījumos. Tās izmanto, pētot dažādus endotēlija šūnu funkciju aspektus, kas saistīti ar angiogenezi, homeostāzi/trombozi, asinsspiediena regulāciju un iekaisumu.

EA.hy926 šūnās Veibela-Palādes ķermeņu un audu specifisko organellu citoplazmas sadalījums, kas novērots elektronu fotomikrogrāfijās, atspoguļo to diferencētās endotēlija šūnu funkcijas. Viena no būtiskākajām EA.hy926 šūnu priekšrocībām ir to spēja iziet vairāk nekā 100 populācijas dubultošanos (PDL), saglabājot savas šūnu īpašības.

Šī ilgmūžība nodrošina ilgtspējīgu un pastāvīgu šūnu avotu ilgtermiņa eksperimentiem un pētījumiem. Šīm šūnām ir 12 stundu dubultošanās laiks, un tām piemīt ātra proliferācija, kas atvieglo eksperimentālo darba procesu un ļauj efektīvi ģenerēt šūnu daudzumus, kas nepieciešami liela mēroga pētījumiem.

EA.hy926 šūnas ir pierādījušas, ka tās ir mainījušas situāciju sirds un asinsvadu pētījumos, jo īpaši endotēlīnu konvertējošā enzīma (ECE) attīrīšanā. Tradicionāli primāro endotēlija šūnu iegūšana ievērojamos daudzumos ir bijusi sarežģīta, kas kavē ECE attīrīšanu.

Tomēr EA.hy926 šūnas, kas iegūtas no transformētām cilvēka nabassaites vēnas endotēlija šūnām, ir kļuvušas par uzticamu alternatīvu ECE aktivitātes pētīšanai. Šis atklājums ir pavēris jaunas iespējas, lai pētītu ECE lomu sirds un asinsvadu slimībās un izstrādātu potenciālas terapeitiskas intervences.

Audums
Umbilikālā vēna, asinsvadu endotēlijs
Sinonīmi
  • EA. hy 926
  • EA hy 926
  • EA-hy926
  • EAhy 926
  • EAHY-926
  • EA.Hy926
  • EA.hy926
  • EAhy926
  • EaHy926
  • Eahy926

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Endotēlija
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
12 stundas

04Identifikatori

Atsauce
EA.hy926 (Cytion kataloga numurs 305034)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_3901

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.