Vai al contenuto
EA.hy926
Tessuto
Vena ombelicale, endotelio vascolare
Sinonimi
EA. hy 926, EA hy 926, EA-hy926, EAhy 926, EAHY-926, EA.Hy926, EA.hy926, EAhy926, EaHy926, Eahy926

Documenti

EA.hy926

Cell line · Codice prodotto 305034

EA.hy926 cells, are a somatic hybrid cell line widely used in cardiovascular disease research. They are employed in studying various aspects of endothelia...

€650.00IVA e spese di spedizione escluse
Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule EA.hy926 sono una linea cellulare ibrida somatica ampiamente utilizzata nella ricerca sulle malattie cardiovascolari. Sono impiegate per studiare vari aspetti delle funzioni delle cellule endoteliali legate all'angiogenesi, all'omeostasi/trombosi, alla regolazione della pressione sanguigna e all'infiammazione.

La distribuzione citoplasmatica dei corpi di Weibel-Palade e degli organelli tessuto-specifici nelle cellule EA.hy926, osservata attraverso fotomicrografie elettroniche, riflette le loro funzioni di cellule endoteliali differenziate. Uno dei vantaggi critici delle cellule EA.hy926 è la loro capacità di subire più di 100 raddoppi di popolazione (PDL) mantenendo le loro proprietà cellulari.

Questa longevità garantisce una fonte cellulare sostenibile e costante per esperimenti e indagini a lungo termine. Con un tempo di raddoppiamento di 12 ore, queste cellule mostrano una rapida proliferazione, facilitando i flussi di lavoro sperimentali e consentendo la generazione efficiente di quantità di cellule necessarie per studi su larga scala.

Le cellule EA.hy926 si sono rivelate una svolta nella ricerca cardiovascolare, in particolare nella purificazione dell'enzima di conversione dell'endotelina (ECE). Tradizionalmente, ottenere cellule endoteliali primarie in quantità significative è stata una sfida, che ha ostacolato la santificazione dell'ECE.

Tuttavia, le cellule EA.hy926, derivate da cellule endoteliali della vena ombelicale umana trasformate, sono emerse come un'alternativa affidabile per lo studio dell'attività dell'ECE. Questa scoperta ha aperto nuove possibilità per studiare il ruolo dell'ECE nelle malattie cardiovascolari e sviluppare potenziali interventi terapeutici.

Tessuto
Vena ombelicale, endotelio vascolare
Sinonimi
  • EA. hy 926
  • EA hy 926
  • EA-hy926
  • EAhy 926
  • EAHY-926
  • EA.Hy926
  • EA.hy926
  • EAhy926
  • EaHy926
  • Eahy926

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Endoteliale
Tempo di raddoppio
12 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
EA.hy926 (numero di catalogo Cytion 305034)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3901

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.