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EA.hy926
Tissue
Veia umbilical, endotélio vascular
Synonyms
EA. hy 926, EA hy 926, EA-hy926, EAhy 926, EAHY-926, EA.Hy926, EA.hy926, EAhy926, EaHy926, Eahy926

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EA.hy926

Cell line · Product number 305034

EA.hy926 cells, are a somatic hybrid cell line widely used in cardiovascular disease research. They are employed in studying various aspects of endothelia...

US$395.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
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1

01General information

Description

As células EA.hy926 são uma linhagem celular híbrida somática amplamente utilizada na pesquisa de doenças cardiovasculares. Elas são empregadas no estudo de vários aspectos das funções das células endoteliais relacionadas à angiogênese, homeostase/trombose, regulação da pressão arterial e inflamação.

A distribuição citoplasmática dos corpos de Weibel-Palade e das organelas específicas do tecido nas células EA.hy926, conforme observado por meio de fotomicrografias eletrônicas, reflete suas funções diferenciadas como células endoteliais. Uma das principais vantagens das células EA.hy926 é sua capacidade de passar por mais de 100 duplicações populacionais (PDLs) enquanto mantêm suas propriedades celulares.

Essa longevidade garante uma fonte celular sustentável e consistente para experimentos e investigações de longo prazo. Com um tempo de duplicação de 12 horas, essas células apresentam rápida proliferação, facilitando os fluxos de trabalho experimentais e permitindo a geração eficiente das quantidades de células necessárias para estudos em grande escala.

As células EA.hy926 provaram ser uma virada de jogo na pesquisa cardiovascular, particularmente na purificação da enzima conversora de endotelina (ECE). Tradicionalmente, a obtenção de células endoteliais primárias em quantidades significativas tem sido um desafio, dificultando a purificação da ECE.

No entanto, as células EA.hy926, derivadas de células endoteliais transformadas da veia umbilical humana, surgiram como uma alternativa confiável para o estudo da atividade da ECE. Esse avanço abriu novas possibilidades para investigar os papéis da ECE nas doenças cardiovasculares e desenvolver possíveis intervenções terapêuticas.

Tissue
Veia umbilical, endotélio vascular
Synonyms
  • EA. hy 926
  • EA hy 926
  • EA-hy926
  • EAhy 926
  • EAHY-926
  • EA.Hy926
  • EA.hy926
  • EAhy926
  • EaHy926
  • Eahy926

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Endotelial
Doubling time
12 horas

04Identifiers

Citation
EA.hy926 (número de catálogo da Cytion 305034)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_3901

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.