Mine otse sisu juurde
EA.hy926
Kude
Nabaveen, vaskulaarne endoteel
Sünonüümid
EA. hy 926, EA hy 926, EA-hy926, EAhy 926, EAHY-926, EA.Hy926, EA.hy926, EAhy926, EaHy926, Eahy926

Dokumendid

EA.hy926

Cell line · Toote number 305034

EA.hy926 cells, are a somatic hybrid cell line widely used in cardiovascular disease research. They are employed in studying various aspects of endothelia...

€650.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

EA.hy926 rakud on somaatiline hübriiderakuliin, mida kasutatakse laialdaselt südame-veresoonkonna haiguste uurimisel. Neid kasutatakse angiogeneesi, homöostaasi/tromboosi, vererõhu reguleerimise ja põletikuga seotud endoteelirakkude funktsioonide erinevate aspektide uurimisel.

Weibel-Palade kehade ja koespetsiifiliste organellide tsütoplasmiline jaotumine EA.hy926 rakkudes, mida on täheldatud elektronmikrofotode abil, peegeldab nende diferentseeritud endoteelirakkude funktsioone. Üks EA.hy926 rakkude kriitilisi eeliseid on nende võime läbida rohkem kui 100 populatsiooni kahekordistumist (PDL), säilitades samal ajal oma raku omadusi.

Selline pikaealisus tagab jätkusuutliku ja järjepideva rakuallika pikaajaliste katsete ja uuringute jaoks. Kuna nende rakkude kahekordistumisaeg on 12 tundi, paljunevad need rakud kiiresti, mis hõlbustab eksperimentaalseid tööprotsesse ja võimaldab suurte uuringute jaoks vajalike rakukoguste tõhusat genereerimist.

EA.hy926 rakud on tõestanud, et nad on muutunud südame-veresoonkonna uuringutes, eriti endoteliini konverteeriva ensüümi (ECE) puhastamisel. Traditsiooniliselt on olnud keeruline saada primaarseid endoteelirakke märkimisväärses koguses, mis on takistanud ECE pühitsemist.

Kuid EA.hy926 rakud, mis on saadud transformeeritud inimese nabaveeni endoteelirakkudest, on osutunud usaldusväärseks alternatiiviks ECE aktiivsuse uurimiseks. See läbimurre on avanud uusi võimalusi ECE rolli uurimiseks kardiovaskulaarsetes haigustes ja võimalike terapeutiliste sekkumiste väljatöötamiseks.

Kude
Nabaveen, vaskulaarne endoteel
Sünonüümid
  • EA. hy 926
  • EA hy 926
  • EA-hy926
  • EAhy 926
  • EAHY-926
  • EA.Hy926
  • EA.hy926
  • EAhy926
  • EaHy926
  • Eahy926

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Endoteeli
Kahekordistumisaeg
12 tundi

04Tunnused

Viide
EA.hy926 (Cytioni kataloognumber 305034)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_3901

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.