Mine otse sisu juurde
786-O rakud
Kude
Neerud
Haigus
Neerurakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Esmane kasvaja asukoht (neer)
Sünonüümid
786-o, 786O, 786-0, 786.O, 786-O RCC, RCC 786-O, RCC_7860, RCC 7860, 7860, 786-0WT

Dokumendid

786-O rakud

Cell line · Toote number 300107

786-O rakud on inimese neerurakk-kartsinoomi rakuliin, mis on saadud neeru esmasest selgerakulise adenokartsinoomist. Seda rakuliini kasutatakse sageli...

€650.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

786-O rakud on inimese neerurakk-kartsinoomi rakuliin, mis on saadud primaarsest selgepiirilisest neeru adenokartsinoomist. Seda rakuliini kasutatakse sageli neerurakk-kartsinoomi (RCC) uurimisel, andes väärtuslikku teavet selle vähitüübi bioloogiliste omaduste ja ravivastuste kohta.

Rakuliinil 786-O on selge raku morfoloogia, mis on tüüpiline kõige levinumale neeruvähi vormile, ja seda iseloomustavad spetsiifilised geneetilised muutused, sealhulgas von Hippel-Lindau (VHL) tuumori supressorgeeni kadumine. See geneetiline omadus on oluline, kuna see mängib olulist rolli paljude selge rakulise neerukartsinoomi patogeneesis, mõjutades hüpoksia poolt indutseeritavaid radu, mis on kesksel kohal rakkude reageerimisel vähesele hapnikule.

Need rakud on eriti kasulikud kasvajate kasvu ja ellujäämisega seotud molekulaarsete mehhanismide, sealhulgas angiogeneesi, ainevahetuse ja rakutsükli regulatsiooniga seotud radade uurimiseks. Tänu VHLi puudulikkusele on 786-O rakud suurepärane mudel hüpoksia mõju uurimiseks ja hüpoksiaga seotud radadele suunatud ravimite katsetamiseks.

Lisaks nende kasutamisele vähi alusuuringutes kasutatakse 786-O rakke ka prekliinilistes uuringutes, et hinnata uute raviainete tõhusust, eriti nende, mis on suunatud angiogeensetele protsessidele, mis on tingitud hüpoksia indutseeritavate faktorite (HIF) üleekspressioonist. Siia kuuluvad HIF-i rada inhibeerivad ravimeetodid, türosiinkinaasi inhibiitorid ja immuunsüsteemi kontrollpunkti inhibiitorid.

Kokkuvõttes on 786-O rakud usaldusväärne mudel, mille abil saame paremini mõista neerurakk-kartsinoomi molekulaarseid aluseid ja arendada sihipäraseid ravimeetodeid, mis võiksid parandada selle raske haiguse patsientide ravitulemusi.

Kude
Neerud
Haigus
Neerurakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Esmane kasvaja asukoht (neer)
Rakendused
Neerurakk-kartsinoomi uurimine; VHL-signaalitee ja HIF-i bioloogia; antiangiogeensete ravimite hindamine; türosiinkinaasi inhibiitorite testimine; transfektsiooni peremeesrakk; selge rakkudega neerurakk-kartsinoomi ksenotransplantaadi mudelid
Sünonüümid
  • 786-o
  • 786O
  • 786-0
  • 786.O
  • 786-O RCC
  • RCC 786-O
  • RCC_7860
  • RCC 7860
  • 7860
  • 786-0WT

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-vaba
GMO-staatuse üksikasjad
No genetic modification; wildtype clear cell RCC line with endogenous VHL loss-of-function
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakud
Tuumorigeenne
Immunosupresseeritud hamstritel
Ploidsus
Hüpertriploidne. Y-kromosoomi täheldati 60% analüüsitud rakkudest.
Karyotüüp
Hüpertriploidne. Y esines 60% uuritud rakkudest
Kahekordistumisaeg
24 tundi

04Tunnused

Viide
786-0 (Cytioni katalooginumber 300107)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1051

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
CAIx +, mida kinnitas FACS-analüüs.
Tooted
Rakud toodavad PTH (parathormooni) sarnast peptiidi, mis on identne rinna- ja kopsukasvaja poolt toodetud peptiididega. Selle N-terminaalne järjestus on sarnane PTH-ga, sellel on PTH-taoline aktiivsus ja molekulmass 6000 daltoni.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 annab 4 päeva jooksul konfluentse monokihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 4 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 48 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
58 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia