Siirry sisältöön
786-O kennot
Kudos
Munuaiset
Sairaus
Munuaissolusyöpä
Metastaasikohde
Ensisijainen kasvainpaikka (munuainen)
Synonyymit
786-o, 786O, 786-0, 786.O, 786-O RCC, RCC 786-O, RCC_7860, RCC 7860, 7860, 786-0WT

Asiakirjat

786-O kennot

Cell line · Tuotenumero 300107

786-O-solut ovat ihmisen munuaissyöpäsolulinja, joka on peräisin munuaisten primaarisesta kirkassoluisesta adenokarsinoomasta. Tätä solulinjaa käytetään usein...

€650.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

786-O-solut ovat ihmisen munuaissolusyöpäsolulinja, joka on peräisin primaarisesta selkeäsoluisesta munuaisten adenokarsinoomasta. Tätä solulinjaa käytetään usein munuaissolusyövän (RCC) tutkimuksessa, ja se tarjoaa arvokasta tietoa tämän syöpätyypin biologisista ominaisuuksista ja hoitovasteista.

786-O-solulinjalla on munuaissyövän yleisimmälle muodolle tyypillinen kirkassoluinen morfologia, ja sille on ominaista erityiset geneettiset muutokset, mukaan lukien von Hippel-Lindau (VHL) -kasvainsuppressorigeenin häviäminen. Tämä geneettinen ominaisuus on merkittävä, koska sillä on ratkaiseva rooli monien selväsoluisten munuaissyöpien patogeneesissä vaikuttamalla hypoksiaa indusoiviin reitteihin, jotka ovat keskeisiä solujen vasteissa vähäisiin happiolosuhteisiin.

Nämä solut ovat erityisen käyttökelpoisia tutkittaessa kasvainten kasvuun ja eloonjäämiseen liittyviä molekyylimekanismeja, mukaan lukien angiogeneesiin, aineenvaihduntaan ja solusyklin säätelyyn liittyvät reitit. VHL-puutoksensa vuoksi 786-O-solut ovat erinomainen malli hypoksian vaikutusten tutkimiseen ja hypoksiaan liittyviin reitteihin kohdistuvien lääkkeiden testaamiseen.

Sen lisäksi, että 786-O-soluja käytetään syövän perustutkimuksessa, niitä käytetään myös prekliinisissä tutkimuksissa arvioitaessa uusien terapeuttisten aineiden tehoa, erityisesti niiden, jotka kohdistuvat hypoksiaa indusoivien tekijöiden (HIF) yli-ilmentymisen aiheuttamiin angiogeenisiin prosesseihin. Näihin kuuluvat HIF-reittiä estävät hoidot, tyrosiinikinaasin estäjät ja immuunijärjestelmän tarkistuspisteiden estäjät.

Kaiken kaikkiaan 786-O-solut tarjoavat vankan mallin, jonka avulla voidaan lisätä ymmärrystä munuaissolusyövän molekulaarisista taustatekijöistä ja kehittää kohdennettuja hoitoja, jotka voivat parantaa tätä haastavaa sairautta sairastavien potilaiden hoitotuloksia.

Kudos
Munuaiset
Sairaus
Munuaissolusyöpä
Metastaasikohde
Ensisijainen kasvainpaikka (munuainen)
Sovellukset
Munuaissolusyövän tutkimus; VHL-signalointireitti ja HIF-biologia; antiangiogeenisten lääkkeiden arviointi; tyrosiinikinaasi-inhibiittorien testaus; transfektiomalli; kirkassoluisen munuaissolusyövän ksenotransplantaattimallit
Synonyymit
  • 786-o
  • 786O
  • 786-0
  • 786.O
  • 786-O RCC
  • RCC 786-O
  • RCC_7860
  • RCC 7860
  • 7860
  • 786-0WT

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-vapaa
GMO-statuksen tiedot
No genetic modification; wildtype clear cell RCC line with endogenous VHL loss-of-function
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolut
Kasvaimia aiheuttava
Immunosuppressoidut hamsterit
Ploidisuus
Hypertriploidi. Y-kromosomi havaittiin 60 prosentissa analysoiduista soluista.
Karyotyyppi
Hypertriploidi. Y esiintyi 60 prosentissa tutkituista soluista
Kaksinkertaistumisaika
24 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
786-0 (Cytionin luettelonumero 300107)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1051

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
CAIx +, kuten FACS-analyysi vahvisti.
Tuotteet
Solut tuottavat PTH:n (lisäkilpirauhashormonin) kaltaista peptidiä, joka on identtinen rinta- ja keuhkokasvainten tuottamien peptidien kanssa. Sen N-terminaalinen sekvenssi on samanlainen kuin PTH:lla, sillä on PTH:n kaltainen aktiivisuus, ja sen molekyylipaino on 6000 daltonia.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Jakosuhde
1–5
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2 tuottaa yhtenäisen yksikerroksen 4 päivän kuluessa.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 4 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua jäädyttämisprosessista ja kiinnittyä vähintään 48 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
58 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen