Pāriet uz saturu
786-O šūnas
Audums
Nieres
Slimība
Nieru šūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Primārā audzēja lokalizācija (nieres)
Sinonīmi
786-o, 786O, 786-0, 786.O, 786-O RCC, RCC 786-O, RCC_7860, RCC 7860, 7860, 786-0WT

Dokumenti

786-O šūnas

Cell line · Preces numurs 300107

786-O šūnas ir cilvēka nieru šūnu karcinomas šūnu līnija, kas iegūta no primārā nieru gaišo šūnu adenokarcinomas. Šo šūnu līniju bieži izmanto...

€650.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

786-O šūnas ir cilvēka nieru šūnu karcinomas šūnu līnija, kas iegūta no primārās nieru gaiššūnu adenokarcinomas. Šo šūnu līniju bieži izmanto nieru šūnu karcinomas (RCC) pētījumos, sniedzot vērtīgu ieskatu par šī vēža veida bioloģiskajām īpašībām un atbildes reakciju uz ārstēšanu.

Šūnu līnijai 786-O piemīt gaiššūnu morfoloģija, kas raksturīga visizplatītākajai nieru vēža formai, un tai ir raksturīgas specifiskas ģenētiskas izmaiņas, tostarp von Hippel-Lindau (VHL) audzēja supresora gēna zudums. Šī ģenētiskā iezīme ir nozīmīga, jo tai ir būtiska nozīme daudzu gaiššūnu nieru karcinomu patoģenēzē, ietekmējot hipoksiju inducējošos ceļus, kas ir galvenie šūnu reakcijā uz zema skābekļa satura apstākļiem.

Šīs šūnas ir īpaši noderīgas, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas saistīti ar audzēja augšanu un izdzīvošanu, tostarp ar angiogēzi, metabolismu un šūnu cikla regulāciju saistītos ceļus. VHL deficīta dēļ 786-O šūnas ir lielisks modelis hipoksijas ietekmes izpētei un zāļu, kas vērstas pret hipoksijas ceļiem, testēšanai.

Papildus to izmantošanai vēža fundamentālajos pētījumos 786-O šūnas izmanto arī pirmsklīniskajos pētījumos, lai novērtētu jaunu terapeitisko līdzekļu efektivitāti, jo īpaši to, kas vērsti pret angiogēnajiem procesiem, kurus izraisa hipoksiju inducējošo faktoru (HIF) pārmērīga ekspresija. Tas ietver terapiju, kas inhibē HIF ceļu, tirozīnkināzes inhibitorus un imūnsistēmas kontrolpunktu inhibitorus.

Kopumā 786-O šūnas ir spēcīgs modelis, kas ļauj labāk izprast nieru šūnu karcinomas molekulāro pamatu un izstrādāt mērķtiecīgas terapijas, kas varētu uzlabot ārstēšanas rezultātus pacientiem ar šo sarežģīto slimību.

Audums
Nieres
Slimība
Nieru šūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Primārā audzēja lokalizācija (nieres)
Pieteikumi
Nieru šūnu karcinomas pētījumi; VHL signālceļš un HIF bioloģija; antiangiogēno zāļu novērtēšana; tirozīna kināzes inhibitoru testēšana; transfekcijas saimniekšūnas; skaidru šūnu nieru šūnu karcinomas ksenotransplantātu modeļi
Sinonīmi
  • 786-o
  • 786O
  • 786-0
  • 786.O
  • 786-O RCC
  • RCC 786-O
  • RCC_7860
  • RCC 7860
  • 7860
  • 786-0WT

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
Bez ĢMO
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
No genetic modification; wildtype clear cell RCC line with endogenous VHL loss-of-function
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija šūnas
Tumorogēns
Imunosupresētiem kāmjiem
Ploidijas statuss
Hipertriploīds. Y hromosoma tika novērota 60 % analizēto šūnu.
Kariotips
Hipertriploīds. Y bija 60% pārbaudīto šūnu
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
24 stundas

04Identifikatori

Atsauce
786-0 (Cytion kataloga numurs 300107)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1051

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
CAIx +, ko apstiprina FACS analīze.
Produkti
Šūnas ražo PTH (parathormonu) līdzīgu peptīdu, kas ir identisks peptīdiem, ko ražo krūts un plaušu audzēji. Tā N termināla sekvence ir līdzīga PTH, tam ir PTH līdzīga aktivitāte, un tā molekulmasa ir 6000 daltonu.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 5
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2 4 dienu laikā izveidosies konfluents monoslānis.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 4 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
58 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis