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786-O Células
Tecido
Rim
Doença
Carcinoma de células renais
Local da metástase
Localização do tumor primário (rim)
Sinónimos
786-o, 786O, 786-0, 786.O, 786-O RCC, RCC 786-O, RCC_7860, RCC 7860, 7860, 786-0WT

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786-O Células

Cell line · Número do produto 300107

As células 786-O são uma linha celular de carcinoma renal humano derivada de um adenocarcinoma de células claras primário do rim. Esta linha celular é frequentemente utilizada em...

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01Informações gerais

Descrição

as células 786-O são uma linha celular de carcinoma de células renais humano derivada de um adenocarcinoma primário de células claras do rim. Esta linha celular é frequentemente utilizada no estudo do carcinoma de células renais (CCR), fornecendo informações valiosas sobre as caraterísticas biológicas e as respostas ao tratamento deste tipo de cancro.

A linha celular 786-O apresenta uma morfologia de células claras, típica da forma mais comum de cancro do rim, e é caracterizada por alterações genéticas específicas, incluindo a perda do gene supressor de tumor von Hippel-Lindau (VHL). Esta caraterística genética é significativa, uma vez que desempenha um papel crucial na patogénese de muitos carcinomas renais de células claras, influenciando as vias induzidas pela hipóxia, que são fundamentais para as respostas celulares a condições de baixo oxigénio.

Estas células são particularmente úteis para estudar os mecanismos moleculares envolvidos no crescimento e sobrevivência dos tumores, incluindo as vias relacionadas com a angiogénese, o metabolismo e a regulação do ciclo celular. Devido à sua deficiência de VHL, as células 786-O são um excelente modelo para a investigação dos efeitos da hipoxia e para o teste de fármacos que visam as vias relacionadas com a hipoxia.

Para além da sua aplicação na investigação básica sobre o cancro, as células 786-O são também utilizadas em estudos pré-clínicos para avaliar a eficácia de novos agentes terapêuticos, especialmente os que visam os processos angiogénicos impulsionados pela sobreexpressão de factores induzíveis pela hipóxia (HIFs). Isto inclui terapias que inibem a via HIF, inibidores da tirosina quinase e inibidores do ponto de controlo imunitário.

De um modo geral, as células 786-O constituem um modelo robusto para o avanço da nossa compreensão dos fundamentos moleculares do carcinoma de células renais e para o desenvolvimento de terapias direcionadas que poderão melhorar os resultados do tratamento de doentes com esta doença difícil.

Tecido
Rim
Doença
Carcinoma de células renais
Local da metástase
Localização do tumor primário (rim)
Aplicações
Investigação sobre o carcinoma de células renais; via VHL e biologia do HIF; avaliação de fármacos antiangiogénicos; testes com inibidores da tirosina quinase; hospedeiro de transfecção; modelos de xenoenxertos de carcinoma de células claras do rim
Sinónimos
  • 786-o
  • 786O
  • 786-0
  • 786.O
  • 786-O RCC
  • RCC 786-O
  • RCC_7860
  • RCC 7860
  • 7860
  • 786-0WT

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
Sem OGM
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
No genetic modification; wildtype clear cell RCC line with endogenous VHL loss-of-function
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliais
Tumorigénico
Em hamsters imunossuprimidos
Estado de ploidia
Hipertriplóide. O cromossoma Y foi observado em 60% das células analisadas.
Cariótipo
Hipertriplóide. O Y estava presente em 60% das células examinadas
Tempo de duplicação
24 horas

04Identificadores

Referência
786-0 (número de catálogo Cytion 300107)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1051

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
CAIx +, como confirmado pela análise FACS.
Produtos
As células produzem um péptido semelhante à PTH (hormona paratiroide) que é idêntico aos péptidos produzidos pelos tumores da mama e do pulmão. Tem uma sequência N terminal semelhante à PTH, tem atividade semelhante à PTH e tem um peso molecular de 6000 daltons.

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 5
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm² resultará numa monocamada confluente em 4 dias.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 4 x 104 células/cm2 e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 48 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
58 anos
Etnia
Caucasiano