Mine otse sisu juurde
KATO-III
Kude
Maha
Haigus
Adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
Kato III, Kato-III, KATO III, KATOIII, KatoIII, KATO 3, JTC-28, Japanese Tissue Culture-28

Dokumendid

KATO-III

Cell line · Toote number 300381

The KATO-III cell line is a human gastric carcinoma model derived from the metastatic site of a poorly differentiated adenocarcinoma. These cells are wide...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KATO-III rakuliin on inimese maokartsinoomi mudel, mis on saadud halvasti diferentseerunud adenokartsinoomi metastaatilisest asukohast. Neid rakke kasutatakse laialdaselt maovähki käsitlevates teadusuuringutes, eelkõige kasvajate progresseerumist, ravimresistentsust ja metastaaside teket põhjustavate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks. KATO-III rakkudel on aneuploidne karüotüüp, mida iseloomustavad mitmed kromosoomianomaaliad, mis aitab kaasa nende agressiivsele vähi fenotüübile. Nad on eelkõige p53 puudulikud, mis on sageli seotud suurenenud kasvajalisusega ja muutunud reaktsiooniga keemiaravile, mistõttu on nad väärtuslik vahend p53 rolli uurimiseks maovähi puhul.

KATO-III rakud kasvavad suspensioonis ja neil on ümar morfoloogia. Neil on suur proliferatsioonivõime, mistõttu sobivad nad mitmesugusteks in vitro rakendusteks, sealhulgas ravimite skriininguks ja tsütotoksilisuse testideks. Neid rakke kasutatakse ka rakkude signaaliradade uuringutes, kuna nende hälbiv signaalimine on maovähi patogeneesi tunnusjoon. Teadlased kasutavad KATO-III rakke sageli selleks, et uurida uute ravimiravimite tõhusust, eriti nende, mis on suunatud HER2, EGFR ja muude asjakohaste onkogeensete radade vastu. See rakuliin on oluline maovähi bioloogia paremaks mõistmiseks ja patsientide tulemuste parandamiseks suunatud sihtotstarbeliste ravimeetodite väljatöötamiseks.

Kude
Maha
Haigus
Adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • Kato III
  • Kato-III
  • KATO III
  • KATOIII
  • KatoIII
  • KATO 3
  • JTC-28
  • Japanese Tissue Culture-28

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Adhesiivne ja suspensioon
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Sfääriline
Tuumorigeenne
Jah, tümotsüütide vastase seerumiga töödeldud hamstrite põsepõskedes, ei tekitanud alasti hiirtel kasvajaid
Karyotüüp
Tüveline kromosoomide arv on hüpotetraploidne, kusjuures 2S-komponent esineb 6,2% ulatuses. Üheksa markerit olid enamiku S-metafaaside puhul ühised, neli markerit olid harvemini esinevad. Üks (mõnikord 2 koopiat) homogeenne värvuspiirkond (HSR) (t(11,HSR) esines kõigis uuritud metafaasides, kuid topeltminute (DM) ei tuvastatud (Sekiguchi 1978).
Kahekordistumisaeg
36 tundi

04Tunnused

Viide
KATO-III (Cytioni katalooginumber 300381)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0371

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53 negatiivne, CEA positiivne
Antigeeni ekspressioon
Veregrupp B, Rh+
Isoensüümid
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, fenotüübi sageduse toode: 0.0742

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilne glutamiin, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820600a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel inkubeerida 37 °C juures 10 minutit. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Külvitihedus
2 x 104 rakku/cm2 annab 2–3 päeva jooksul tulemuseks konfluentse monokihi.
Vedeliku vahetus
Iga 3 kuni 5 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
57 aastat
Etniline kuuluvus
Aasia