Pāriet uz saturu
KATO-III
Audums
Kuņģis
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
Kato III, Kato-III, KATO III, KATOIII, KatoIII, KATO 3, JTC-28, Japanese Tissue Culture-28

Dokumenti

KATO-III

Cell line · Preces numurs 300381

The KATO-III cell line is a human gastric carcinoma model derived from the metastatic site of a poorly differentiated adenocarcinoma. These cells are wide...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

KATO-III šūnu līnija ir cilvēka kuņģa karcinomas modelis, kas iegūts no vāji diferencētas adenokarcinomas metastātiskas vietas. Šīs šūnas plaši izmanto pētījumos, kas vērsti uz kuņģa vēzi, jo īpaši, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas nosaka audzēja progresēšanu, rezistenci pret zālēm un metastāzes. KATO-III šūnām ir aneuploīds kariotips, ko raksturo vairākas hromosomu anomālijas, kas veicina to agresīvo vēža fenotipu. Šīm šūnām ir izteikts p53 deficīts, kas bieži vien ir saistīts ar paaugstinātu audzēja aktivitāti un izmainītu reakciju uz ķīmijterapiju, padarot tās par vērtīgu līdzekli, lai pētītu p53 lomu kuņģa vēža gadījumā.

KATO-III šūnas aug suspensijā, un tām ir noapaļota morfoloģija. Tām piemīt augsta proliferācijas spēja, tāpēc tās ir piemērotas dažādiem in vitro lietojumiem, tostarp zāļu skrīningam un citotoksicitātes testiem. Šīs šūnas izmanto arī šūnu signalizācijas ceļu pētījumos, jo to aberantā signalizācija ir raksturīga kuņģa vēža patoģenēzei. Pētnieki bieži izmanto KATO-III šūnas, lai pētītu jaunu terapeitisko līdzekļu efektivitāti, jo īpaši to, kas vērsti pret HER2, EGFR un citiem attiecīgajiem onkogēnajiem ceļiem. Šī šūnu līnija ir būtiska, lai uzlabotu mūsu izpratni par kuņģa vēža bioloģiju un izstrādātu mērķtiecīgas terapijas, kuru mērķis ir uzlabot pacientu ārstēšanas rezultātus.

Audums
Kuņģis
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • Kato III
  • Kato-III
  • KATO III
  • KATOIII
  • KatoIII
  • KATO 3
  • JTC-28
  • Japanese Tissue Culture-28

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Adhēzija un suspensija
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Sfēriskais
Tumorogēns
Jā, pret timocītu serumu apstrādātu kāmju vaigu maisiņos, nav tumorogēns nude pelēm
Kariotips
Cilmes līnijas hromosomu skaits ir hipotetraploīds, un 2S komponents ir 6,2 %. Deviņi marķieri bija kopīgi lielākajai daļai S metafāžu, četri marķieri bija retāk sastopami. Visās pārbaudītajās metafāzēs bija viens (dažkārt 2 kopijas) homogēnās krāsošanas reģions (HSR) (t(11,HSR), bet dubultās minūtes (DM) netika konstatētas (Sekiguchi 1978).
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
36 stundas

04Identifikatori

Atsauce
KATO-III (Cytion kataloga numurs 300381)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0371

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
P53 negatīvs, CEA pozitīvs
Antigēna ekspresija
B asinsgrupa, Rh+
Izoenzīmi
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotipu biežuma produkts: 0.0742

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
Hama F12, w: 1,0 mM stabils glutamīns, w: 1,0 mM nātrija piruvāts, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820600a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un saudzīgi izmazgā pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmanto 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties 37 °C temperatūrā 10 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
Sēšanas blīvums
2 x 104 šūnas/cm2 2–3 dienu laikā veidos konfluentu monoslāni.
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 3 līdz 5 dienām
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
57 gadi
Etniskā piederība
Āzijas