Siirry sisältöön
KATO-III
Kudos
Vatsa
Sairaus
Adenokarsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
Kato III, Kato-III, KATO III, KATOIII, KatoIII, KATO 3, JTC-28, Japanese Tissue Culture-28

Asiakirjat

KATO-III

Cell line · Tuotenumero 300381

The KATO-III cell line is a human gastric carcinoma model derived from the metastatic site of a poorly differentiated adenocarcinoma. These cells are wide...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

KATO-III-solulinja on ihmisen mahasyöpämalli, joka on peräisin huonosti erilaistuneen adenokarsinooman etäpesäkkeestä. Näitä soluja hyödynnetään laajalti mahasyöpään keskittyvässä tutkimuksessa, erityisesti kasvaimen etenemistä, lääkeresistenssiä ja etäpesäkkeitä ohjaavien molekyylimekanismien tutkimisessa. KATO-III-soluilla on aneuploidinen karyotyyppi, jolle on ominaista useat kromosomipoikkeavuudet, mikä osaltaan vaikuttaa niiden aggressiiviseen syöpäfenotyyppiin. Ne ovat erityisesti p53-puutteellisia, mikä liittyy usein lisääntyneeseen kasvainherkkyyteen ja muuttuneeseen vasteeseen kemoterapialle, mikä tekee niistä arvokkaan välineen p53:n roolin tutkimiseen mahasyövässä.

KATO-III-solut kasvavat suspensiossa ja niillä on pyöreä morfologia. Niillä on suuri proliferaatiokapasiteetti, minkä vuoksi ne soveltuvat erilaisiin in vitro -sovelluksiin, kuten lääkeaineiden seulontaan ja sytotoksisuustesteihin. Näitä soluja käytetään myös solujen signalointireittien tutkimuksissa, koska niiden poikkeava signalointi on yksi mahasyövän patogeneesin tunnusmerkki. Tutkijat käyttävät usein KATO-III-soluja tutkiessaan uusien terapeuttisten aineiden tehoa, erityisesti HER2:een, EGFR:ään ja muihin merkityksellisiin onkogeenisiin reitteihin kohdistuvien aineiden tehoa. Tämä solulinja on olennaisen tärkeä, jotta voimme syventää ymmärrystä mahasyövän biologiasta ja kehittää kohdennettuja hoitoja, joilla pyritään parantamaan potilaiden hoitotuloksia.

Kudos
Vatsa
Sairaus
Adenokarsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • Kato III
  • Kato-III
  • KATO III
  • KATOIII
  • KatoIII
  • KATO 3
  • JTC-28
  • Japanese Tissue Culture-28

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Adheesio ja suspensio
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Pallomainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, kymosyyttiseerumilla käsiteltyjen hamstereiden poskipussissa, ei aiheuta kasvaimia alastomilla hiirillä
Karyotyyppi
Varren kromosomiluku on hypotetraploidi, ja 2S-komponentin osuus on 6,2 prosenttia. Yhdeksän markkeria oli yhteistä useimmille S-metafaaseille, neljä markkeria oli harvinaisempia. Yksi (toisinaan 2 kopiota) homogeeninen värjäytymisalue (HSR) (t(11,HSR) esiintyi kaikissa tutkituissa metafaaseissa, mutta kaksoisminuutteja (DM) ei havaittu (Sekiguchi 1978).
Kaksinkertaistumisaika
36 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
KATO-III (Cytionin luettelonumero 300381)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0371

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
P53 negatiivinen, CEA positiivinen
Antigeenin ilmentyminen
Veriryhmä B, Rh+
Isoentsyymit
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotyypin frekvenssituote: 0.0742

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820600a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Kerää suspensiosolut 15 ml:n putkeen ja pese kiinni olevat solut varovasti PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml T25-pulloissa ja 5-10 ml T75-pulloissa). Levitä Accutasea (1-2 ml T25-pulloihin, 2,5 ml T75-pulloihin) varmistaen, että solukerros peittyy kokonaan. Anna solujen inkuboitua 37 °C:ssa 10 minuuttia. Inkuboinnin jälkeen yhdistetään ja sentrifugoidaan sekä suspensio että adherentit solut. Sentrifugoinnin jälkeen solupelletti suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensio uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
2 x 104 solua/cm2 tuottaa yhtenäisen yksikerroksen 2–3 päivässä.
Nesteen uusiminen
3-5 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
57 vuotta
Etnisyys
Aasialainen