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KATO-III
Tecido
Estômago
Doença
Adenocarcinoma
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
Kato III, Kato-III, KATO III, KATOIII, KatoIII, KATO 3, JTC-28, Japanese Tissue Culture-28

Documentos

KATO-III

Cell line · Número do produto 300381

The KATO-III cell line is a human gastric carcinoma model derived from the metastatic site of a poorly differentiated adenocarcinoma. These cells are wide...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular KATO-III é um modelo de carcinoma gástrico humano derivado do local metastático de um adenocarcinoma pouco diferenciado. Estas células são amplamente utilizadas na investigação centrada no cancro gástrico, nomeadamente para estudar os mecanismos moleculares que determinam a progressão do tumor, a resistência aos medicamentos e as metástases. As células KATO-III apresentam um cariótipo aneuploide, caracterizado por múltiplas anomalias cromossómicas, o que contribui para o seu fenótipo agressivo de cancro. São notavelmente deficientes em p53, uma caraterística frequentemente associada a um aumento da tumorigenicidade e a respostas alteradas à quimioterapia, o que as torna uma ferramenta valiosa para investigar o papel do p53 no cancro gástrico.

As células KATO-III crescem em suspensão e apresentam uma morfologia arredondada. Possuem uma elevada capacidade de proliferação, o que as torna adequadas para várias aplicações in vitro, incluindo o rastreio de medicamentos e ensaios de citotoxicidade. Estas células são também utilizadas em estudos das vias de sinalização celular, uma vez que a sua sinalização aberrante é uma caraterística da patogénese do cancro gástrico. Os investigadores utilizam frequentemente as células KATO-III para explorar a eficácia de novos agentes terapêuticos, em especial os que visam o HER2, o EGFR e outras vias oncogénicas relevantes. Esta linha celular é essencial para o avanço da nossa compreensão da biologia do cancro gástrico e para o desenvolvimento de terapias orientadas destinadas a melhorar os resultados dos doentes.

Tecido
Estômago
Doença
Adenocarcinoma
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
  • Kato III
  • Kato-III
  • KATO III
  • KATOIII
  • KatoIII
  • KATO 3
  • JTC-28
  • Japanese Tissue Culture-28

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Adesão e suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Esférico
Tumorigénico
Sim, em bolsas de bochecha de hamsters tratados com soro anti-timócito, não tumorigénico em ratinhos nus
Cariótipo
O número de cromossomas da linha de caule é hipotetraplóide com o componente 2S a ocorrer em 6,2%. Nove marcadores foram comuns à maioria das metáfases S, quatro marcadores foram menos frequentes. Uma (ocasionalmente 2 cópias) região de coloração homogénea (HSR) (t(11,HSR) estava presente em todas as metáfases examinadas, mas não foram detectados minutos duplos (DM) (Sekiguchi 1978).
Tempo de duplicação
36 horas

04Identificadores

Referência
KATO-III (número de catálogo Cytion 300381)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0371

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
P53 negativo, CEA positivo
Expressão do antígeno
Tipo de sangue B, Rh+
Isoenzimas
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Produto de frequência fenotípica: 0.0742

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
Ham's F12, com: 1,0 mM de glutamina estável, com: 1,0 mM de piruvato de sódio, com: 1,1 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820600a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Reunir as células em suspensão num tubo de 15 ml e lavar suavemente as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (utilizar 3-5 ml para os frascos T25 e 5-10 ml para os frascos T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para os frascos T25, 2,5 ml para os frascos T75), assegurando a cobertura total da camada celular. Deixar as células incubar a 37°C durante 10 minutos. Após a incubação, combinar e centrifugar tanto a suspensão como as células aderentes. Após a centrifugação, ressuspender cuidadosamente o pellet de células e transferir a suspensão de células para novos frascos contendo meio fresco.
Densidade de sementeira
2 x 104 células/cm² resultarão numa monocamada confluente dentro de 2 a 3 dias.
Renovação de fluidos
A cada 3 a 5 dias
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
57 anos
Etnia
Asiático