Siirry sisältöön
A3
Kudos
Perifeerinen veri
Sairaus
Akuutti T-lymfoblastileukemia lapsuudessa
Metastaasikohde
Ei ilmoitettu (perifeerisen veren T-ALL)

Asiakirjat

A3

Cell line · Tuotenumero 305143

A3 cells are human T lymphoblasts derived from the Jurkat cell line obtained from the laboratory of Gerald Crabtree at Stanford University. These cells po...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

A3-solut ovat ihmisen T-lymfoblasteja, jotka on johdettu Jurkat-solulinjasta, joka on saatu Gerald Crabtreen laboratoriosta Stanfordin yliopistosta. Näillä soluilla on lymfoblastimorfologia, ne kasvavat suspensiossa ja ovat erittäin tärkeitä akuutin T-soluleukemian tutkimuksessa, 3D-soluviljelysovelluksissa, immuunijärjestelmän häiriöiden tutkimuksessa ja immunologiassa.

Nämä solut ovat peräisin Jurkat-solulinjasta, jota on käsitelty Fas-vasta-aineella, jotta saataisiin alhainen spontaani resistenssi Fas-välitteiselle apoptoosille. Tämä ominaisuus tekee A3-soluista erittäin arvokkaita immuunijärjestelmän häiriöiden tutkimisessa ja mahdollisten terapeuttisten kohteiden tunnistamisessa.

Kudos
Perifeerinen veri
Sairaus
Akuutti T-lymfoblastileukemia lapsuudessa
Metastaasikohde
Ei ilmoitettu (perifeerisen veren T-ALL)
Sovellukset
T-ALL-tutkimus; T-soluleukemian biologia; lääkeherkkyystutkimukset; immunofenotyyppaus; lasten leukemiamallit

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Kasvuominaisuudet
Jousitus
GMO-status
GMO-vapaa
GMO-statuksen tiedot
No genetic modification; wildtype T-ALL cell line
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Lymfoblastit
Solutyyppi
T-lymfoblastit

04Tunnisteet

Lähdeviite
A3 (Cytionin tuotenumero 305143)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1061

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Homogenoi solususpensio varovasti pullossa pipetoimalla ylös ja alas, ota sitten edustava näyte solutiheyden määrittämiseksi millilitraa kohti. Laimenna suspensio tuoreella viljelyalustalla solupitoisuudeksi 1 x 105 solua/ml ja jaa säädetty suspensio uusiin pulloihin jatkokäsittelyä varten.
Jakosuhde
1–4
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.