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A3
Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Leucemia linfoblastica acuta T dell'infanzia
Sito metastatico
Non riportato (T-ALL nel sangue periferico)

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A3

Cell line · Codice prodotto 305143

A3 cells are human T lymphoblasts derived from the Jurkat cell line obtained from the laboratory of Gerald Crabtree at Stanford University. These cells po...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule A3 sono linfoblasti T umani derivati dalla linea cellulare Jurkat ottenuta dal laboratorio di Gerald Crabtree dell'Università di Stanford. Queste cellule hanno una morfologia da linfoblasto, crescono in sospensione e sono molto importanti per lo studio della leucemia acuta a cellule T, per le applicazioni di coltura cellulare 3D, per la ricerca sui disturbi del sistema immunitario e per l'immunologia.

Queste cellule derivano dalla linea cellulare Jurkat, trattata con l'anticorpo Fas per ottenere un basso tasso di resistenza spontanea all'apoptosi mediata da Fas. Questa caratteristica rende le cellule A3 molto preziose per lo studio della disregolazione del sistema immunitario e per l'identificazione di potenziali bersagli terapeutici.

Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Leucemia linfoblastica acuta T dell'infanzia
Sito metastatico
Non riportato (T-ALL nel sangue periferico)
Applicazioni
Ricerca T-ALL; biologia della leucemia a cellule T; studi sulla sensibilità ai farmaci; immunofenotipizzazione; modelli di leucemia pediatrica

02Classificazione

Organismo
Umano
Proprietà di crescita
Sospensione
Presenza di OGM
Senza OGM
Dettagli sullo stato degli OGM
No genetic modification; wildtype T-ALL cell line
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Linfoblasto
Tipo di cellula
Linfoblasti T

04Identificatori

Riferimento bibliografico
A3 (numero di catalogo Cytion 305143)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1061

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Subcoltura
Omogeneizzare delicatamente la sospensione cellulare nel pallone pipettando verso l'alto e verso il basso, quindi prelevare un campione rappresentativo per determinare la densità cellulare per ml. Diluire la sospensione per ottenere una concentrazione cellulare di 1 x 105 cellule/ml con terreno di coltura fresco e aliquotare la sospensione regolata in nuovi palloni per l'ulteriore coltivazione.
Rapporto di frazionamento
Da 1 a 4
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.