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A3
Tissue
Sangue periférico
Disease
Leucemia linfoblástica aguda de tipo T na infância
Metastatic site
Não relatado (T-ALL no sangue periférico)

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A3

Cell line · Product number 305143

A3 cells are human T lymphoblasts derived from the Jurkat cell line obtained from the laboratory of Gerald Crabtree at Stanford University. These cells po...

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1

01General information

Description

As células A3 são linfoblastos T humanos derivados da linhagem celular Jurkat, obtida do laboratório de Gerald Crabtree na Universidade de Stanford. Essas células apresentam morfologia de linfoblasto, crescem em suspensão e são de grande relevância no estudo da leucemia aguda de células T, em aplicações de cultura celular 3D, na pesquisa de distúrbios do sistema imunológico e na imunologia.

Essas células são derivadas da linhagem celular Jurkat, que foi tratada com anticorpo Fas para obter uma baixa taxa de resistência espontânea à apoptose mediada por Fas. Essa característica torna as células A3 altamente valiosas para a investigação da desregulação do sistema imunológico e a identificação de potenciais alvos terapêuticos.

Tissue
Sangue periférico
Disease
Leucemia linfoblástica aguda de tipo T na infância
Metastatic site
Não relatado (T-ALL no sangue periférico)
Applications
Pesquisa sobre T-ALL; biologia da leucemia de células T; estudos de sensibilidade a medicamentos; imunofenotipagem; modelos de leucemia pediátrica

02Classification

Organism
Human
Growth properties
Suspension
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype T-ALL cell line
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Linfoblasto
Cell type
Linfoblastos T

04Identifiers

Citation
A3 (número de catálogo da Cytion 305143)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1061

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Subculturing
Homogeneíze suavemente a suspensão celular no frasco por meio de pipetagem para cima e para baixo e, em seguida, colete uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão com meio de cultura fresco até atingir uma concentração celular de 1 x 10⁵ células/ml e distribua a suspensão ajustada em alíquotas em novos frascos para continuação do cultivo.
Split ratio
1 a 4
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.