Siirry sisältöön
Panc 05.04
Kudos
Haima
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
Panc-05.04, Panc_05_04, Panc05.04, Panc 5.04, Panc5.04, PANC0504, Panc0504, Pa18C, PL-18, PL18

Asiakirjat

Panc 05.04

Cell line · Tuotenumero 305394

The Panc 05.04 cell line is a pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) model that serves as a valuable resource for studying pancreatic cancer biology and ...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Panc 05.04 -solulinja on haiman duktaalisen adenokarsinooman (PDAC) malli, joka toimii arvokkaana resurssina haimasyövän biologian ja hoitovasteiden tutkimuksessa. Ihmisen haimasyövästä peräisin oleva Panc 05.04 on keskeinen työkalu prekliinisessä tutkimuksessa, koska se liittyy yhteen aggressiivisimmista pahanlaatuisista kasvaimista, joiden potilaiden ennuste on huono. Tällä solulinjalla on molekyyli- ja genomiominaisuuksia, jotka vastaavat PDAC:n heterogeenistä luonnetta, mukaan lukien KRAS-, TP53- ja muissa haimasyövän etenemisessä yleisesti esiintyvissä ajurionkogeeneissä yleisesti havaittavat mutaatiot.

Panc 05.04:ää on profiloitu laajasti osana laajamittaisia genomi-hankkeita, kuten Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) -hanketta, jossa sen geeniekspressio, kopioiden lukumäärän vaihtelut ja lääkeherkkyys on karakterisoitu. Erityisesti Panc 05.04:n farmakologista vastetta erilaisille syöpälääkkeille on arvioitu, mikä tarjoaa tietoa sen herkkyys- tai resistenssiprofiileista kemoterapiaan ja kohdennettuihin hoitoihin nähden.

Mallijärjestelmänä Panc 05.04 helpottaa PDAC:n etenemisen, kemoresistenssin ja kasvaimen mikroympäristön vuorovaikutusten taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimusta. Se tarjoaa myös alustan uusien kohdennettujen hoitojen ja immunoterapeuttisten strategioiden testaamiselle, joiden tavoitteena on voittaa haimasyövän vaikeasti hoidettava luonne.

Kudos
Haima
Sairaus
Adenokarsinooma
Sovellukset
3D-soluviljely
Synonyymit
  • Panc-05.04
  • Panc_05_04
  • Panc05.04
  • Panc 5.04
  • Panc5.04
  • PANC0504
  • Panc0504
  • Pa18C
  • PL-18
  • PL18

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolu
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä; kyllä nude- tai SCID-hiirillä
Kaksinkertaistumisaika
46 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
Panc 05.04 (Cytion-tuotenumero 305394)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCl_1637

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
MHC-luokka I +; MHC-luokka II -; veriryhmä B; Rh+
Onkogeenit
K-ras+
Mutaatioprofiili
Mutaatio: KRAS, yksinkertainen, p.Gly12Asp (c.35G>A), heterotsygoottinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisää elatusaineeseen 15 % FBS:ää ja 20 µg/ml ihmisen rekombinanttia insuliinia
Dissosiaatioreagenssi
Trypsin-EDTA
Soluviljely
Rutiininomaiseen adherenttiseen soluviljelyyn: Imeytä vanha elatusaine adheesiosoluista ja pese ne PBS:llä jäljellä olevan elatusaineen poistamiseksi. Kun PBS on imetty, lisätään sopiva määrä trypsiini/EDTA-liuosta viljelyastian koon mukaan (esim. 1 ml T25-pulloon, 3 ml T75-pulloon) ja inkuboidaan huoneenlämmössä tai 37 °C:ssa, kunnes solut irtoavat (5-10 minuuttia). Seuraa irtoamista mikroskoopilla ja napauta astiaa tarvittaessa varovasti solujen irrottamiseksi. Kun solut ovat irronneet, lisätään täyttä elatusainetta trypsiinin/EDTA:n inaktivoimiseksi, solut suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensiosta aliquota uuteen kasvatusastiaan, joka sisältää tuoretta elatusainetta. Aseta astia inkubaattoriin, jonka lämpötila on 37 °C jahiilidioksidipitoisuus 5 %, ja vaihda väliaine 2-3 päivän välein.
Nesteen uusiminen
1-2 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
77 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen