Siirry sisältöön
PANC 08.13
Kudos
Haima
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
Panc 8.13, Panc-08.13, PANC-08-13, Panc_08_13, Panc08.13, Panc8.13, Panc-8_13, Panc-813, PANC 813, Panc813, PANC813, PANC0813, Panc0813, Pa14C, PL9, PL-9

Asiakirjat

PANC 08.13

Cell line · Tuotenumero 305391

The PANC 08.13 cell line, also known as PL9, is a pancreatic cancer cell model derived from adenocarcinoma. It has been included in studies focused on und...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

PANC 08.13 -solulinja, joka tunnetaan myös nimellä PL9, on adenokarsinoomasta johdettu haimasyöpäsolumalli. Sitä on käytetty tutkimuksissa, joissa on pyritty ymmärtämään genomin variaatioita, kuten alleelien menetystä, homotsygoottisia deleetioita ja laajempaa kromosomien epävakautta. Tämä solulinja on osa laajaa haimasyöpämallien kokonaisuutta, jota käytetään syöpäsolujen somaattisten muutosten analysointiin, erityisesti silloin, kun vastaavia normaaleja kudoksia ei ole saatavilla, mikä tekee siitä ihanteellisen korkean resoluution geneettiseen kartoitukseen.

Tutkimuksessa, jossa hyödynnettiin Affymetrix 100K SNP -mikrosiruja, PANC 08.13 -solulinjaa tutkittiin yhdessä 25 muun haimasyöpäsolulinjan kanssa. Nämä mikrosirut mahdollistivat yksittäisten nukleotidipolymorfismien (SNP:iden) tiheän analyysin ja paljastivat alleelistatuksen koko genomin laajuisesti ilman, että tarvittiin vastaavia normaaleja näytteitä. Tällaiset tutkimukset auttavat tunnistamaan alleelihäviön (LOH), geenideleetioiden ja kromosomien rekombinaatiotapahtumien kriittisiä alueita, joita esiintyy usein haimasyöpäsoluissa.

PANC 08.13:n geneettiseen karakterisointiin sisältyy tyypillisesti haimasyöpään liittyviä ajurigeeneissä esiintyviä yleisiä mutaatioita, kuten KRAS-, TP53-, CDKN2A- ja SMAD4-geeneissä. Nämä geneettiset viat ovat haiman duktaalisen adenokarsinooman tunnusmerkkejä ja vaikuttavat hallitsemattomaan solujen lisääntymiseen, häiriintyneeseen solusyklin säätelyyn sekä puutteellisiin apoptoosimekanismeihin. PANC 08.13:n kaltaisia solulinjoja hyödyntävät tutkimukset mahdollistavat kohdennettujen hoitojen kehittämisen ja uusien terapeuttisten haavoittuvuuksien tunnistamisen haimasyövässä.

Kudos
Haima
Sairaus
Adenokarsinooma
Sovellukset
3D-soluviljely, Syöpätutkimus
Synonyymit
  • Panc 8.13
  • Panc-08.13
  • PANC-08-13
  • Panc_08_13
  • Panc08.13
  • Panc8.13
  • Panc-8_13
  • Panc-813
  • PANC 813
  • Panc813
  • PANC813
  • PANC0813
  • Panc0813
  • Pa14C
  • PL9
  • PL-9

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolu
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä; kyllä nude- tai SCID-hiirillä
Kaksinkertaistumisaika
20 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
PANC 08.13 (Cytion-tuotenumero 305391)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1638

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
MHC-luokka I +; MHC-luokka II -
Onkogeenit
K-ras+
Mutaatioprofiili
Mutaatio: KRAS, yksinkertainen, p.Gly12Asp (c.35G>A), homotsygoottinen; Mutaatio: SMAD4, yksinkertainen, p.Cys123Metfs*2 (c.366dupA) (c.366_367insA), homotsygoottinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisää elatusaineeseen 15 % FBS:ää ja 0,01 mg/ml insuliinia
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Rutiininomaiseen adherenttiseen soluviljelyyn: Imeytä vanha elatusaine adheesiosoluista ja pese ne PBS:llä jäljellä olevan elatusaineen poistamiseksi. Kun PBS on imetty, lisätään sopiva määrä trypsiini/EDTA-liuosta viljelyastian koon mukaan (esim. 1 ml T25-pulloon, 3 ml T75-pulloon) ja inkuboidaan huoneenlämmössä tai 37 °C:ssa, kunnes solut irtoavat (5-10 minuuttia). Seuraa irtoamista mikroskoopilla ja napauta astiaa tarvittaessa varovasti solujen irrottamiseksi. Kun solut ovat irronneet, lisätään täyttä elatusainetta trypsiinin/EDTA:n inaktivoimiseksi, solut suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensiosta aliquota uuteen kasvatusastiaan, joka sisältää tuoretta elatusainetta. Aseta astia inkubaattoriin, jonka lämpötila on 37 °C jahiilidioksidipitoisuus 5 %, ja vaihda väliaine 2-3 päivän välein.
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
85 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen