Pāriet uz saturu
PANC 08.13
Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
Panc 8.13, Panc-08.13, PANC-08-13, Panc_08_13, Panc08.13, Panc8.13, Panc-8_13, Panc-813, PANC 813, Panc813, PANC813, PANC0813, Panc0813, Pa14C, PL9, PL-9

Dokumenti

PANC 08.13

Cell line · Preces numurs 305391

The PANC 08.13 cell line, also known as PL9, is a pancreatic cancer cell model derived from adenocarcinoma. It has been included in studies focused on und...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Šūnu līnija PANC 08.13, kas pazīstama arī kā PL9, ir no adenokarcinomas atvasināts aizkuņģa dziedzera vēža šūnu modelis. Tā ir iekļauta pētījumos, kuru mērķis ir izprast genomiskās variācijas, tostarp alēļu zudumu, homozigotiskas delēcijas un plašāku hromosomu nestabilitāti. Šī šūnu līnija ir daļa no plaša aizkuņģa dziedzera vēža modeļu kopuma, ko izmanto, lai analizētu somatiskas izmaiņas vēža šūnās, jo īpaši gadījumos, kad nav atbilstošu normālu audu, tādējādi padarot to ideāli piemērotu augstas izšķirtspējas ģenētiskajai kartēšanai.

Pētījumā, kurā tika izmantoti Affymetrix 100K SNP mikromatricas, PANC 08.13 tika pētīta kopā ar 25 citām aizkuņģa dziedzera vēža šūnu līnijām. Šīs mikromatricas ļāva veikt augstas blīvuma analīzi vienu nukleotīdu polimorfismiem (SNP) un atklāja alēļu statusu visā genomā, neizmantojot atbilstošus normālus paraugus. Šādi pētījumi palīdz identificēt kritiskos alēļu zuduma (LOH) reģionus, gēnu delēcijas un hromosomu rekombinācijas gadījumus, kas ir bieži sastopami aizkuņģa dziedzera vēža šūnās.

PANC 08.13 ģenētiskajā raksturojumā ietilpst biežas mutācijas vadītājgēnos, kas parasti saistīti ar aizkuņģa dziedzera vēzi, piemēram, KRAS, TP53, CDKN2A un SMAD4. Šie ģenētiskie defekti ir raksturīgi aizkuņģa dziedzera duktālajai adenokarcinomai un veicina nekontrolētu šūnu proliferāciju, traucētu šūnu cikla regulāciju un apoptozes mehānismu darbības traucējumus. Pētījumi, kuros izmanto šūnu līnijas, piemēram, PANC 08.13, ļauj izstrādāt mērķtiecīgas terapijas un identificēt jaunus terapeitiskos vājos punktus aizkuņģa dziedzera vēža ārstēšanā.

Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Adenokarcinoma
Pieteikumi
3D šūnu kultūras, Vēža pētniecība
Sinonīmi
  • Panc 8.13
  • Panc-08.13
  • PANC-08-13
  • Panc_08_13
  • Panc08.13
  • Panc8.13
  • Panc-8_13
  • Panc-813
  • PANC 813
  • Panc813
  • PANC813
  • PANC0813
  • Panc0813
  • Pa14C
  • PL9
  • PL-9

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija šūna
Tumorogēns
Jā; jā, nude vai SCID pelēm
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
20 stundas

04Identifikatori

Atsauce
PANC 08.13 (Cytion kataloga numurs 305391)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1638

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
MHC I klase +; MHC II klase –
Onkogēni
K-ras+
Mutāciju profils
Mutācija: KRAS, vienkārša, p.Gly12Asp (c.35G>A), homozigota; Mutācija: SMAD4, vienkārša, p.Cys123Metfs*2 (c.366dupA) (c.366_367insA), homozigota

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 15 % FBS un 0,01 mg/ml insulīna
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Parastai adherentu šūnu kultūrai: Lai noņemtu atlikušo barotni, aspirējiet veco barotni no pielipušajām šūnām un izskalojiet tās ar PBS, lai noņemtu atlikušo barotni. Pēc PBS atsūknēšanas pievienojiet atbilstošu tripsīna/EDTA šķīduma tilpumu atkarībā no kultūras trauka lieluma (piemēram, 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai) un inkubējiet istabas temperatūrā vai 37 °C, līdz šūnas atdalās (5-10 minūtes). Novērot atdalīšanos ar mikroskopu un, ja nepieciešams, viegli piesitiet trauku, lai atbrīvotu šūnas. Pēc atdalīšanās pievienot pilnu barotni, lai inaktivētu tripsīnu/EDTA, uzmanīgi resuspendēt šūnas un šūnu suspensijas alikvotu pārvietot jaunā barotnē ar svaigu barotni. Ievietot trauku inkubatorā, kas iestatīts 37 °C temperatūrā ar 5 %CO2, un ik pēc 2-3 dienām mainīt barotni.
Sēšanas blīvums
1–3 × 10⁴/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
85 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis