Pāriet uz saturu
Panc02
Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Peles aizkuņģa dziedzera duktālā adenokarcinoma
Sinonīmi
Panc-02, Panc 02, Pan02, PAN 02, Panc02-H0

Dokumenti

Panc02

Cell line · Preces numurs 300501

The Panc02 cell line is a widely used murine model for studying pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC), the most common and aggressive form of pancreatic...

€650.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Panc02 šūnu līnija ir plaši izmantots peļu modelis aizkuņģa dziedzera duktālās adenokarcinomas (PDAC) - visizplatītākās un agresīvākās aizkuņģa dziedzera vēža formas - izpētei. Panc02 šūnas sākotnēji tika iegūtas no ķīmiski inducēta aizkuņģa dziedzera audzēja C57BL/6 pelēm. Šai šūnu līnijai ir liela nozīme pirmsklīniskajos pētījumos, jo to var ortotopiski implantēt singēniskām pelēm, imitējot dabisko audzēja vidi un sniedzot ieskatu PDAC imūnās reakcijas un terapeitiskās rezistences mehānismos.

Pētījumi, kuros izmanto Panc02, ir snieguši nozīmīgu ieskatu PDAC imunosupresīvajā mikrovidē. Vienā pētījumā atklājās, ka Panc02 audzēji ir stipri infiltrēti ar regulatīvajām T-šūnām (Tregs), kas nomāc pretvēža imūno atbildi. Tika konstatēts, ka ārstēšana ar gemcitabīna mazām devām selektīvi izslēdz Tregs Panc02 audzēju nēsātājām pelēm, kā rezultātā pastiprinās pretvēža imūnā atbilde un nedaudz palielinās izdzīvošanas ilgums. Tas liecina, ka imūnmodulācija varētu būt daudzsološa PDAC ārstēšanas stratēģija.

Papildus imūnterapijas pētījumiem Panc02 tika izmantota arī nekroptozes - programmētas šūnu nāves veida - izpētei. Ir pierādīts, ka Aurora kināzes A inhibīcija Panc02 šūnās izraisa nekroptozi, kas ir svarīga, lai pārvarētu rezistenci pret apoptozi PDAC. Tas nodrošina potenciālu terapeitisku pieeju, lai iedarbotos uz vēža šūnām, kas ir rezistentas pret apoptozi, veicinot neapoptozes šūnu nāves ceļus.

Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Peles aizkuņģa dziedzera duktālā adenokarcinoma
Sinonīmi
  • Panc-02
  • Panc 02
  • Pan02
  • PAN 02
  • Panc02-H0

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Identifikatori

Atsauce
Panc02 (Cytion kataloga numurs 300501)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_D627

04Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

06Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/6
Donora vecums
Nav norādīts