Siirry sisältöön
SNU-638
Kudos
Mahalaukku
Sairaus
Adenokarsinooma
Metastaasikohde
Askites
Synonyymit
SNU638

Asiakirjat

SNU-638

Cell line · Tuotenumero 305634

The SNU-638 cell line is a human gastric carcinoma model established from the ascitic fluid of a male gastric cancer patient. It exhibits poor differentia...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

SNU-638-solulinja on ihmisen mahasyöpämalli, joka on luotu miespuolisen mahasyöpäpotilaan askitia-nesteestä. Sillä on huono erilaistuminen ja minimaalinen desmoplasia, ja in vitro se kasvaa sekoittuneena, heterogeenisen tiheästi ja kiinnittyy huonosti viljelyalustaan. Solujen ääriviivat vaihtelevat pyöreästä soikeaan, ja niissä on matala ydin- ja sytoplasmasuhde, ja mikrovillien kehittyminen on vähäistä. Nämä ominaisuudet heijastavat ominaisuuksia, jotka liittyvät yleisesti aggressiivisiin mahasyövän fenotyyppeihin, ja tekevät linjasta sopivan huonosti erilaistuneiden mahalaukun adenokarsinoomien tutkimiseen.

Molekyylitasolla SNU-638:ssa ei ole mutaatioita *c-Ki-ras*-geenissä, mutta se ilmentää runsaasti kasvaimeen liittyviä merkkiaineita, kuten CA 19-9:ää ja kudospolypeptidiantigeenia (TPA), eikä siinä esiinny alfa-fetoproteiinia (AFP). Siinä on myös *TP53*-geenimutaatio, jota esiintyy usein mahasyövissä ja jolla on keskeinen rooli kasvainten synnyssä. Genomiprofilointi osoitti, että SNU-638:ssa ei ole MET-monistumista tai -yliekspressiota, joten se luokitellaan MET-negatiiviseksi, jonka riippuvuus MET-signalointireitistä on minimaalinen. Tämä molekyyliprofiili tekee SNU-638:sta arvokkaan kontrollisolulinjan tutkimuksissa, jotka kohdistuvat MET:ään tai joissa arvioidaan MET:n estäjien tehoa mahasyövässä.

Kudos
Mahalaukku
Sairaus
Adenokarsinooma
Metastaasikohde
Askites
Synonyymit
  • SNU638

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteeli
Kaksinkertaistumisaika
25 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
SNU-638 (Cytionin luettelonumero 305634)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0102

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: Asn375Ser (c.1124A>G), määrittelemätön; Mutaatio: MET, yksinkertainen, p.Asn375Ser (c.1124A>G), määrittelemätön: TP53, yksinkertainen, p.Arg282Trp (c.844C>T), heterotsygoottinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poistetaan elatusaine, lisätään tuoretta 0,25 %:n trypsiiniliuosta, 0,02 %:n EDTA-liuosta, kasvatuspulloa seisotetaan 37''''C:ssa 3-5 minuuttia, lisätään elatusainetta ja kerätään solut, siirretään elatusaine 15 ml:n putkeen, sentrifugoidaan, imetään elatusaine, suspendoidaan pelletit uudelleen elatusaineella ja annostellaan kasvatuspulloon
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
48 vuotta
Etnisyys
Korean