Tartalomra ugrás
DC2.4
Szövet
Csontvelő
Szinonimák
DC 2.4

Dokumentumok

DC2.4

Cell line · Termékszám 305515

A DC2.4 sejtvonal egy csontvelőből származó, halhatatlanná tett egér dendritikus sejtvonal. Általában a dendritikus sejtek (DC) biológiájának vizsgálatára használják...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A DC2.4 sejtvonal egy immortalizált egér dendritikus sejtvonal, amely csontvelőből származik. Általában a dendritikus sejtek (DC) biológiájának, az immunválaszoknak és az immunterápiák fejlesztésének tanulmányozására használják. A DC2.4 sejtekre jellemző, hogy antigénprezentáló sejtek (APC-k), és ismert, hogy expresszálják a dendritikus sejtek tipikus felszíni markereit, például a CD11c-t és az MHC I. osztályú molekulákat. Ugyanakkor a standard tenyésztési körülmények között éretlen fenotípust mutatnak, az MHC II. osztályú és az olyan kostimuláló molekulák, mint a CD40 és CD80 alacsony expressziójával. Ez teszi őket hasznossá a DC éréshez szükséges mechanizmusok és ingerek, valamint a későbbi immunfunkciók vizsgálatára.

Vizsgálatok kimutatták, hogy specifikus ingerek indukálhatják a DC2.4 sejtek érését. Különösen az interferon-gamma (IFN-γ) expozíció vezet az MHC II. osztály, a CD40, CD80 és CCR7 jelentős felszabályozásához, valamint a citokinek, köztük az IL-6, IL-12 és TNF-α fokozott szekréciójához. Az IFN-γ-érlelt DC2.4 sejtek bizonyítottan hatékonyan aktiválják a CD8+ citotoxikus T-sejteket in vitro és in vivo, fokozva a tumorellenes immunitást. Például kimutatták, hogy az IFN-γ-vel kezelt, antigénnel stimulált DC2.4 sejtek robusztus CD8+ T-sejtválaszt indukálnak és protektív tumorellenes hatást fejtenek ki egérmodellekben. Ez rávilágít a sejtvonal hasznosságára a rákos immunterápiás kutatásokban és a vakcinafejlesztésben.

A DC2.4 sejteket emellett a gazdatest-patogén kölcsönhatások tanulmányozására is alkalmazták, mivel a különböző immunrendszeri kihívásokra adott válaszuk utánozhatja a veleszületett immunrendszer aktiválódásának aspektusait. A DC2.4 sejtek exoszomális miRNS-profiljainak elemzése, különösen amikor olyan kórokozókkal fertőzöttek, mint a Toxoplasma gondii, betekintést nyújtott a dendritikus sejtek jelátvitelének és az immunkommunikációnak a hátterében álló molekuláris mechanizmusokba. Az exoszomális miRNS-ek differenciált expressziója a fertőzésre adott válaszként a gazdaszervezet immunitásának modulálásában betöltött potenciális szerepre utal, és kiemeli a DC2.4 sejtek hasznosságát az exoszóma- és RNS-alapú immunológiai kutatásokban.

Szövet
Csontvelő
Szinonimák
  • DC 2.4

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nem meghatározott
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This murine dendritic cell line (DC2.4) contains retroviral constructs encoding murine GM-CSF, v-myc and v-raf introduced by transduction, supporting transformation and growth. The inserts are stably present in the dendritic cell-derived line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Sejttípus
Dendritikus sejt

04Azonosítók

Hivatkozás
DC2.4 (Cytion katalógusszám: 305515)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_J409

05Kifejeződés és fogékonyság

Vírusok
Transzformáns: J2 rekombináns retrovírus

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-sel, 1% NEAA-val és 10 mM HEPES-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
C57BL/6
Az adományozó életkora
Meghatározatlan