DC2.4

La linea cellulare DC2.4 è una linea immortalizzata di cellule dendritiche di topo che proviene dal midollo osseo. È comunemente utilizzata per studiare la biologia delle cellule dendritiche (DC), le risposte immunitarie e lo sviluppo di immunoterapie. Le cellule DC2.4 sono caratterizzate dal ruolo di cellule presentanti l'antigene (APC) e sono note per esprimere i marcatori di superficie tipici delle cellule dendritiche, come il CD11c e le molecole MHC di classe I. Tuttavia, in condizioni di coltura standard, presentano un fenotipo immaturo, con bassa espressione di MHC di classe II e di molecole costimolatorie come CD40 e CD80. Ciò le rende utili per studiare i meccanismi e gli stimoli necessari per la maturazione delle DC e le loro successive funzioni immunitarie.

Gli studi hanno dimostrato che stimoli specifici possono indurre la maturazione delle cellule DC2.4. In particolare, l'esposizione all'interferone-gamma (IFN-γ) porta a una significativa upregulation di MHC di classe II, CD40, CD80 e CCR7, nonché a un aumento della secrezione di citochine, tra cui IL-6, IL-12 e TNF-α. È stato dimostrato che le cellule DC2.4 maturate con IFN-γ attivano efficacemente le cellule T citotossiche CD8+ sia in vitro che in vivo, potenziando l'immunità antitumorale. Ad esempio, è stato dimostrato che le cellule DC2.4 trattate con IFN-γ e con un impulso di antigene inducono risposte robuste delle cellule T CD8+ e forniscono effetti protettivi antitumorali in modelli murini. Ciò evidenzia l'utilità della linea cellulare nella ricerca sull'immunoterapia del cancro e nello sviluppo di vaccini.

Inoltre, le cellule DC2.4 sono state impiegate per studiare le interazioni ospite-patogeno, poiché la loro risposta a varie sfide immunitarie può imitare gli aspetti dell'attivazione del sistema immunitario innato. L'analisi dei profili di miRNA esosomiali delle cellule DC2.4, soprattutto in caso di infezione da agenti patogeni come il Toxoplasma gondii, ha permesso di comprendere i meccanismi molecolari alla base della segnalazione delle cellule dendritiche e della comunicazione immunitaria. L'espressione differenziale dei miRNA esosomiali in risposta all'infezione suggerisce ruoli potenziali nella modulazione dell'immunità dell'ospite e sottolinea l'utilità delle DC2.4 nella ricerca immunitaria basata su esosomi e RNA.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia