DC2.4

Linia komórkowa DC2.4 jest unieśmiertelnioną linią mysich komórek dendrytycznych pochodzących ze szpiku kostnego. Jest ona powszechnie wykorzystywana do badania biologii komórek dendrytycznych (DC), odpowiedzi immunologicznych i rozwoju immunoterapii. Komórki DC2.4 charakteryzują się rolą komórek prezentujących antygen (APC) i są znane z ekspresji typowych markerów powierzchniowych komórek dendrytycznych, takich jak CD11c i cząsteczki MHC klasy I. Wykazują one jednak niedojrzały fenotyp w standardowych warunkach hodowli, z niską ekspresją MHC klasy II i cząsteczek kostymulujących, takich jak CD40 i CD80. To sprawia, że są one przydatne do badania mechanizmów i bodźców wymaganych do dojrzewania DC i ich późniejszych funkcji immunologicznych.

Badania wykazały, że określone bodźce mogą indukować dojrzewanie komórek DC2.4. W szczególności ekspozycja na interferon-gamma (IFN-γ) prowadzi do znacznej regulacji MHC klasy II, CD40, CD80 i CCR7, a także zwiększonego wydzielania cytokin, w tym IL-6, IL-12 i TNF-α. Wykazano, że dojrzałe komórki DC2.4 IFN-γ skutecznie aktywują cytotoksyczne limfocyty T CD8+ zarówno in vitro, jak i in vivo, wzmacniając odporność przeciwnowotworową. Na przykład, wykazano, że poddane działaniu IFN-γ, pulsowane antygenem komórki DC2.4 indukują silną odpowiedź komórek T CD8+ i zapewniają ochronne działanie przeciwnowotworowe w modelach mysich. Podkreśla to użyteczność tej linii komórkowej w badaniach nad immunoterapią nowotworów i opracowywaniu szczepionek.

Dodatkowo, komórki DC2.4 zostały wykorzystane do badania interakcji gospodarz-patogen, ponieważ ich odpowiedź na różne wyzwania immunologiczne może naśladować aspekty aktywacji wrodzonego układu odpornościowego. Analiza egzosomalnych profili miRNA z komórek DC2.4, szczególnie w przypadku zakażenia patogenami takimi jak Toxoplasma gondii, dostarczyła wglądu w mechanizmy molekularne leżące u podstaw sygnalizacji komórek dendrytycznych i komunikacji immunologicznej. Zróżnicowana ekspresja egzosomalnych miRNA w odpowiedzi na infekcję sugeruje potencjalną rolę w modulowaniu odporności gospodarza i podkreśla użyteczność DC2.4 w badaniach immunologicznych opartych na egzosomach i RNA.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym