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DC2.4
Tissue
骨髓
Synonyms
DC 2.4

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DC2.4

Cell line · Product number 305515

The DC2.4 cell line is an immortalized mouse dendritic cell line that originates from bone marrow. It is commonly used to study dendritic cell (DC) biolog...

US$800.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

DC2.4 細胞系是一種源自骨髓的不朽化小鼠樹突細胞系。它常被用於研究樹突細胞(DC)的生物學特性、免疫反應,以及免疫療法的開發。 DC2.4 細胞的特徵在於其作為抗原呈遞細胞(APC)的作用,且已知會表達樹突細胞的典型表面標記,例如 CD11c 及 MHC I 類分子。 然而,在標準培養條件下,它們表現出未成熟的表型,其 MHC II 類分子以及 CD40 和 CD80 等共刺激分子的表達水平較低。這使得它們成為研究樹突細胞成熟所需機制與刺激因子,以及其後續免疫功能的理想模型。

研究表明,特定刺激可誘導 DC2.4 細胞成熟。 值得注意的是,接觸干擾素-γ(IFN-γ)會導致 MHC II 類、CD40、CD80 和 CCR7 顯著上調,並增加包括 IL-6、IL-12 和 TNF-α 在內的細胞因子分泌。 研究證實,經 IFN-γ 成熟的 DC2.4 細胞無論在體外或體內,皆能有效活化 CD8+ 細胞毒性 T 細胞,從而增強抗腫瘤免疫反應。 例如,研究顯示,經 IFN-γ 處理並經抗原脈衝的 DC2.4 細胞,能在小鼠模型中誘導強烈的 CD8+ T 細胞反應,並發揮保護性的抗腫瘤效果。這凸顯了該細胞系在癌症免疫療法研究及疫苗開發方面的實用價值。

此外,DC2.4 細胞亦被用於研究宿主與病原體之間的相互作用,因為其對各種免疫挑戰的反應,能夠模擬先天免疫系統活化的某些方面。 對 DC2.4 細胞外泌體 miRNA 譜的分析——特別是在感染弓形蟲(Toxoplasma gondii)等病原體時——為樹突細胞訊號傳導與免疫通訊背後的分子機制提供了新見解。 感染後外泌體中微RNA的差異表達,暗示其在調控宿主免疫方面可能扮演重要角色,並凸顯了 DC2.4 在外泌體及以 RNA 為基礎的免疫研究中的實用價值。

Tissue
骨髓
Synonyms
  • DC 2.4

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine dendritic cell line (DC2.4) contains retroviral constructs encoding murine GM-CSF, v-myc and v-raf introduced by transduction, supporting transformation and growth. The inserts are stably present in the dendritic cell-derived line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
樹突狀細胞

04Identifiers

Citation
DC2.4(Cytion 型號 305515)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_J409

05Expression and susceptibility

Viruses
轉化體:重組逆轉錄病毒 J2

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640,含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% FBS、1% NEAA 及 10mM HEPES
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6
Donor age
未指定