الانتقال إلى المحتوى
DC2.4
الأنسجة
النخاع العظمي
المرادفات
DC 2.4

المستندات

DC2.4

Cell line · رقم المنتج 305515

سلسلة الخلايا DC2.4 هي سلسلة خلايا شجيرية من الفئران مُخلَّدة، تنشأ من نخاع العظم. وتُستخدم عادةً لدراسة الخصائص البيولوجية للخلايا الشجيرية (DC)...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

إن خط الخلايا DC2.4 هو خط خلايا متغصنة غير خالدة للفأر تنشأ من نخاع العظم. ويُستخدم عادةً لدراسة بيولوجيا الخلايا التغصنية (DC) والاستجابات المناعية وتطوير العلاجات المناعية. وتتميز خلايا DC2.4 بدورها كخلايا مقدمة للمستضد (APCs) ومن المعروف أنها تعبر عن العلامات السطحية النموذجية للخلايا المتغصنة، مثل جزيئات CD11c وجزيئات MHC من الفئة الأولى. ومع ذلك، فإنها تُظهر نمطًا ظاهريًا غير ناضج في ظل ظروف الاستزراع القياسية، مع تعبير منخفض عن جزيئات الفئة الثانية من MHC وجزيئات التحفيز مثل CD40 وCD80. وهذا يجعلها مفيدة لدراسة الآليات والمحفزات اللازمة لنضج الخلايا DC ووظائفها المناعية اللاحقة.

أظهرت الدراسات أن محفزات محددة يمكن أن تحفز نضوج خلايا DC2.4. وعلى وجه الخصوص، يؤدي التعرض للإنترفيرون-جاما (IFN-γ) إلى زيادة كبيرة في تنظيم الفئة الثانية من مركب التوافق الصبغي المتعدد (MHC) وCD40 وCD80 وCCR7، بالإضافة إلى زيادة إفراز السيتوكينات، بما في ذلك IL-6 وIL-12 وTNF-α. وقد ثبت أن خلايا DC2.4 الناضجة من نوع IFN-γ الناضجة من نوع DC2.4 تنشط الخلايا التائية السامة للخلايا CD8+ بشكل فعال في المختبر وفي الجسم الحي، مما يعزز المناعة المضادة للورم. على سبيل المثال، تبين أن خلايا DC2.4 المعالجة بإيفن-γ المعالجة بالمستضدات النابضة من خلايا DC2.4 تحفز استجابات قوية للخلايا التائية CD8+ وتوفر تأثيرات وقائية مضادة للأورام في نماذج الفئران. وهذا يسلط الضوء على فائدة خط الخلايا في أبحاث العلاج المناعي للسرطان وتطوير اللقاحات.

بالإضافة إلى ذلك، استُخدمت خلايا DC2.4 لدراسة التفاعلات بين المضيف ومسببات الأمراض، حيث يمكن أن تحاكي استجابتها للتحديات المناعية المختلفة جوانب تنشيط الجهاز المناعي الفطري. وقد وفّر تحليل ملامح الحمض النووي الريبوزي المرسال الخارجي من خلايا DC2.4، خاصة عند إصابتها بمسببات الأمراض مثل التوكسوبلازما جوندي، رؤى حول الآليات الجزيئية الكامنة وراء إشارات الخلايا التغصنية والتواصل المناعي. ويشير التعبير التفاضلي للحمض النووي الريبوزي النووي للخلايا الخارجية استجابةً للعدوى إلى أدوار محتملة في تعديل مناعة المضيف، ويسلط الضوء على فائدة خلايا DC2.4 في أبحاث المناعة القائمة على الإكسوسومات والحمض النووي الريبوزي.

الأنسجة
النخاع العظمي
المرادفات
  • DC 2.4

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
غير محدد
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This murine dendritic cell line (DC2.4) contains retroviral constructs encoding murine GM-CSF, v-myc and v-raf introduced by transduction, supporting transformation and growth. The inserts are stably present in the dendritic cell-derived line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

نوع الخلية
الخلية الشجيرية

04المعرّفات

المرجع
DC2.4 (كتالوج سايتون رقم الكتالوج 305515)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_J409

05التعبير والقابلية للإصابة

الفيروسات
المتحوِّل: الفيروس الارتجاعي المؤتلف J2

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
أضف إلى الوسط 10٪ من مصل الأجنة البشري (FBS)، و1٪ من الأحماض الأمينية غير الأساسية (NEAA)، و10 مليمولار من HEPES
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
C57BL/6
عمر المتبرع
غير محدد