DC2.4

A linhagem celular DC2.4 é uma linhagem de células dendríticas de camundongo imortalizadas, originária da medula óssea. É comumente utilizada para estudar a biologia das células dendríticas (DC), as respostas imunológicas e o desenvolvimento de imunoterapias. As células DC2.4 são caracterizadas por seu papel como células apresentadoras de antígenos (APCs) e são conhecidas por expressarem marcadores de superfície típicos das células dendríticas, como CD11c e moléculas do MHC de classe I. No entanto, elas apresentam um fenótipo imaturo em condições padrão de cultura, com baixa expressão de MHC classe II e moléculas coestimuladoras como CD40 e CD80. Isso as torna úteis para investigar os mecanismos e estímulos necessários para a maturação das DCs e suas funções imunológicas subsequentes.

Estudos demonstraram que estímulos específicos podem induzir a maturação das células DC2.4. Notavelmente, a exposição ao interferon-gama (IFN-γ) leva a uma regulação positiva significativa do MHC classe II, CD40, CD80 e CCR7, bem como ao aumento da secreção de citocinas, incluindo IL-6, IL-12 e TNF-α. Foi demonstrado que as células DC2.4 maduras por IFN-γ ativam efetivamente as células T citotóxicas CD8+ tanto in vitro quanto in vivo, potenciando a imunidade antitumoral. Por exemplo, demonstrou-se que células DC2.4 tratadas com IFN-γ e pulsadas com antígenos induzem respostas robustas de células T CD8+ e proporcionam efeitos antitumorais protetores em modelos murinos. Isso destaca a utilidade da linhagem celular na pesquisa de imunoterapia contra o câncer e no desenvolvimento de vacinas.

Além disso, as células DC2.4 têm sido empregadas para estudar as interações hospedeiro-patógeno, uma vez que sua resposta a vários desafios imunológicos pode imitar aspectos da ativação do sistema imunológico inato. A análise dos perfis de miRNA exossomais das células DC2.4, especialmente quando infectadas por patógenos como o Toxoplasma gondii, proporcionou insights sobre os mecanismos moleculares subjacentes à sinalização das células dendríticas e à comunicação imunológica. A expressão diferencial de miRNAs exossomais em resposta à infecção sugere papéis potenciais na modulação da imunidade do hospedeiro e destaca a utilidade das células DC2.4 na pesquisa imunológica baseada em exossomos e RNA.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.