DC2.4

A linha de células DC2.4 é uma linha de células dendríticas imortalizadas de ratinho que tem origem na medula óssea. É normalmente utilizada para estudar a biologia das células dendríticas (DC), as respostas imunitárias e o desenvolvimento de imunoterapias. As células DC2.4 caracterizam-se pelo seu papel como células apresentadoras de antigénios (APC) e são conhecidas por expressarem marcadores de superfície típicos das células dendríticas, como as moléculas CD11c e MHC de classe I. No entanto, apresentam um fenótipo imaturo em condições normais de cultura, com baixa expressão de MHC de classe II e de moléculas coestimuladoras como CD40 e CD80. Este facto torna-as úteis para investigar os mecanismos e estímulos necessários para a maturação das CD e as suas funções imunitárias subsequentes.

Estudos demonstraram que estímulos específicos podem induzir a maturação das células DC2.4. Nomeadamente, a exposição ao interferão-gama (IFN-γ) conduz a uma regulação positiva significativa do MHC de classe II, CD40, CD80 e CCR7, bem como a um aumento da secreção de citocinas, incluindo IL-6, IL-12 e TNF-α. Foi demonstrado que as células DC2.4 amadurecidas com IFN-γ activam eficazmente as células T citotóxicas CD8+ tanto in vitro como in vivo, aumentando a imunidade antitumoral. Por exemplo, demonstrou-se que as células DC2.4 tratadas com IFN-γ e pulsadas com antigénio induzem respostas robustas de células T CD8+ e proporcionam efeitos antitumorais protectores em modelos de ratinhos. Isto realça a utilidade da linha celular na investigação da imunoterapia contra o cancro e no desenvolvimento de vacinas.

Além disso, as células DC2.4 têm sido utilizadas para estudar as interações entre o hospedeiro e o agente patogénico, uma vez que a sua resposta a vários desafios imunitários pode imitar aspectos da ativação do sistema imunitário inato. A análise dos perfis de miRNA exossomal das células DC2.4, especialmente quando infectadas com agentes patogénicos como o Toxoplasma gondii, permitiu compreender os mecanismos moleculares subjacentes à sinalização das células dendríticas e à comunicação imunitária. A expressão diferencial de miRNAs exossómicos em resposta à infeção sugere potenciais papéis na modulação da imunidade do hospedeiro e realça a utilidade das células DC2.4 na investigação imunitária baseada em exossomas e RNA.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia